PCR analiza hepatitisa C i interpretacija rezultata

Hepatitis C je ozbiljna virusna bolest koja se pojavljuje u tijelu pacijenta pod utjecajem bakterija kao što je HCV. Ovisno o stupnju razvoja, takva se patologija može pojaviti bez simptoma ili se manifestirati kao žutica, smanjena aktivnost i drugi funkcionalni poremećaji. Istodobno, ova se bolest može izliječiti samo prvih nekoliko tjedana, dok je njezin patogen u inkubacijskom razdoblju. U početnoj fazi kvalitativna analiza hepatitisa C može dijagnosticirati infekciju..

Opće činjenice o hepatitisu C

Hepatitis kategorije C smatra se najopasnijim od svih vrsta virusnih patologija, jer ima vrlo visoku osjetljivost na mutacije. Jednom u tijelu, komponente RNA stalno mijenjaju svoju strukturu, zbog čega imunološki sustav ne može samostalno proizvesti prava antitijela za prirodni lijek bolesti. To omogućava da se infekcija širi bez većih prepreka..

Nakon nekoliko tjedana virus mutira do takvog stanja da osoba počne osjećati prve simptome, što se manifestira u obliku:

  • Periodična vrtoglavica;
  • Mučnina ili čak povraćanje;
  • Kronični umor;
  • Bol u desnom hipohondriju;
  • Vrućica.


Nakon faze pogoršanja, bolest postaje kronična. Uz pomoć terapije lijekovima, pacijent ga može podržati samo u razdoblju inkubacije, izbjegavajući ponovljene recidive.

Indikacije za dijagnozu

Kvalitativno istraživanje RNA stanica hepatitisa C ne provodi se na zahtjev pacijenta, indikacije za takav postupak mogu poslužiti samo:

  • Ispitivanje tkiva uzgojenog pomoću biopsije;
  • Istraživanje leukemije i malignih tumora;
  • Dijagnoza tijela za prisutnost genetskih patologija u njemu;
  • Identifikacija osobe usporedbom pacijentovih tjelesnih tekućina i dostupnih biomaterijala;
  • Otkrivanje uzročnika virusne infekcije (sa miješanim hepatitisom).

Osim toga, RNA analiza može pokazati procjenu učinkovitosti trenutnog tijeka terapije, što je vrlo važno u liječenju virusnih bolesti.

Što je PCR analiza?

Studija lančane reakcije polimeraze je dubinska analiza krvi koja se provodi kako bi se otkrile stanice RNA virusa u njoj. Ovisno o smjeru, ovaj postupak može pokazati:

  • Prisutnost ili odsutnost hepatitisa u tijelu (kvalitativna vrsta PCR-a);
  • Virusno opterećenje na imunološki sustav (kvantitativni test koji pokazuje razinu ribonukleinske kiseline u krvi);
  • Trenutni genotip bolesti (genotipizacija).

Od svih gore navedenih testova, samo prvi se provodi bez pogreške. Na temelju rezultata njegove dešifriranja liječnik će moći saznati više detalja o trenutnoj bolesti.

Glavne prednosti studije

Usporedimo li PCR analizu s postupcima kao što su: UAC, ELISA i ultrazvučno skeniranje, tada će prvi test imati niz karakterističnih prednosti:

  • Velika brzina obrade rezultata;
  • Sposobnost proučavanja gotovo svih ljudskih bioloških tekućina (znoj, suze, krv, struganje sa sluznice pa čak i epitela kože);
  • Prisutnost pokazatelja virusnog opterećenja;
  • Potpuna dezinfekcija ispitivanog materijala (takav se postupak provodi prije početka PCR analize, kako bi se spriječile infekcije dobivenom tekućinom);
  • Visok sadržaj informacija (ova reakcija pokazuje ne samo prisustvo virusa, nego i određuje njegovu prirodu).

Važno je znati! Jedini nedostatak PCR testa za hepatitis C je potreba za složenom obukom osoblja i opreme.

Kvalitativni PCR za hepatitis C

Rezultat kvalitetnog PCR za hepatitis C temeljni je pokazatelj cijele studije, jer zahvaljujući njemu liječnik može utvrditi prisutnost patologije u pacijenta. Ali negativan odgovor na gornju reakciju neće uvijek ukazivati ​​na potpuno zdravo tijelo. Doista, ako se broj RNA stanica spusti ispod prihvatljive razine, PCR skeniranje jednostavno ih neće primijetiti.

Dešifriranje rezultata analize

Kvalitativno PCR testiranje na prisustvo RNA hepatitisa C može pokazati samo dva moguća odgovora. Razmotrite vrijednosti koje ukazuju na normalno stanje osobe i patologiju koja je u tijeku.

Norma

Normalan pokazatelj kvalitativnog ispitivanja lančane reakcije polimeraze je negativan rezultat testa. Promatra se s nultom vrijednošću virusnog opterećenja i odsutnosti otkrivenog genotipa. No, kako bi se u potpunosti potvrdila njihova sigurnost, za pacijenta je bolje proći niz dodatnih postupaka kojima se mogu prepoznati bolesti koje dovode do infekcije hepatitisom C..

odstupanja

Ako je PCR test pokazao pozitivan odgovor, onda je to jasan znak da je virus prisutan u tijelu osobe koja se proučava. Ovisno o kvantitativnoj vrijednosti (od 1,8x do 2,4x), liječnik će moći odrediti trenutnu fazu svog razvoja, što će biti prvi korak u izradi ispravnog tijeka terapije. A uz pomoć genotipizacije može se otkriti kategorija hepatitisa i prije njegovih karakterističnih manifestacija (pokazatelji B1, B2 ili B3).

Lažni pozitivni i lažno negativni rezultati

Sam PCR test gotovo nikada ne pogriješi. No, pod utjecajem ljudskog faktora, vjerojatnost lažne dijagnoze značajno se povećava. Stoga, da bi se dobilo što ispravnije dekodiranje, prije provođenja lančane reakcije polimeraze, moraju se uzeti u obzir sljedeća pravila:

  1. Svi proučavani biomaterijali trebaju biti na pristojnoj udaljenosti jedan od drugog (kombinacija bilo kojih biokomponenata uvijek će uzrokovati lažno pozitivan rezultat);
  2. Dobivene tekućine na analizu je potrebno čuvati i prevoziti u posebnim zaštićenim spremnicima u kojima se promatra temperaturni režim (biološke komponente vrlo lako gube svoja svojstva, što također uzrokuje pogrešnu dijagnozu);
  3. Prije rada s biomaterijalima, laboratorijsku sobu treba dobro obraditi tako da u testnu tekućinu ne uđu smeće;
  4. Upotreba reagensa kojima je istekao rok strogo je zabranjena (takav nemar nije neuobičajen u modernim medicinskim ustanovama).

Važno je znati! Ispravnost rezultata PCR-a može ovisiti o samom pacijentu ako ne slijedi pravila pripreme za uzimanje krvi. Rezultat svake od ovih situacija bit će drugi test.

Učestalost PCR analize

Suvremena medicina ne nameće ograničenja na visokokvalitetnoj PCR analizi za hepatitis C. Ali oni provode ovaj postupak za svaku kategoriju pacijenata određeni broj puta. Naime:

  • Ljudima u čijem tijelu nema patologije - ne više od 1-2 puta godišnje;
  • Pacijenti koji su na tijeku liječenja hepatitisa C - 2 puta (prije početka terapije i bliže njezinoj sredini);
  • Trudnice - barem 1-2 puta mjesečno, tijekom razdoblja rođenja ploda (tada se test izvodi ne više od 2 puta godišnje);
  • Dojenčad stara nekoliko tjedana - najmanje 2 puta godišnje.

Zbog svoje sigurnosti, metoda PCR često se koristi čak i za novorođenčad, što se smatra još jednom značajnom prednosti..

Cijena lančane reakcije polimeraze znatno se razlikuje od standardnih studija. Zbog toga neki si to ne mogu priuštiti. No, prema drugim kriterijima, ovaj test nema konkurenciju, pa ga liječnici najčešće preporučuju..

PCR za hepatitis C

PCR - moderna dijagnoza hepatitisa C

Virusni hepatitis C jedna je od najglupljih bolesti jetre. Dugo je asimptomatska, što dovodi do kroničnog procesa (u 80%). U većini slučajeva završava fibrozom jetre, prelazi u cirozu ili tumor organa.

Posebni značaj imaju metode rane dijagnoze bolesti. Polimerna lančana reakcija (PCR) omogućuje vam dijagnosticiranje nekoliko dana nakon infekcije.

Ukratko o virusnom hepatitisu C

Patogen - RNA koja sadrži virus koji ima nekoliko podvrsta. Prodire u ljudsko tijelo putem krvi: seksualno, transfuzijom krvi, injekcijama i drugim invazivnim medicinskim postupcima.

Akutni oblik bolesti nema značajnih simptoma. Ponekad postoji ozbiljnost u desnom hipohondriju, što većina pacijenata ne primjećuje.

Kronični oblik dovodi do kršenja svih funkcija jetre: intoksikacije, bolova u trbuhu, žutice, bolova u zglobovima i mnogih drugih. U ovom trenutku proces postaje nepovratan..

Često, kronični hepatitis C postaje prethodnica maligne degeneracije jetrenog tkiva.

Suština PCR metode

PCR-om se virusna RNA utvrđuje 5 dana nakon infekcije. Tijekom tog razdoblja, imunološki odgovor još nije pokrenut, rezultati serološkog testa bit će negativni, klinički simptomi su potpuno odsutni.

Upravo PCR dijagnostika omogućava postavljanje dijagnoze u ranoj fazi bolesti, kada adekvatno liječenje značajno poboljšava prognozu za pacijenta. Postoje dvije vrste PCR-a - kvalitativni i kvantitativni.

Tehnika kvalitete

Otkriva genetski materijal virusa hepatitisa C u minimalnoj količini. Rezultat je dvije vrste:

  1. "Otkriveno" - pozitivna reakcija, koja ukazuje na prisutnost bolesti kod ljudi.
  2. "Nije otkriveno" - negativna analiza, koja pokazuje odsutnost infekcije ili prisutnost virusa u tako malim količinama koje nije utvrđena ovom metodom. To ne daje stopostotnu vjerojatnost da pacijent nema virusni hepatitis C.

Krv se najčešće koristi za analizu, ali prikladna je i slina, sjemenska tekućina i druga biološka tekućina..

PCR za hepatitis C

Kvantitativna tehnika

Ovo je složenija i skuplja metoda koja se provodi prema određenim pokazateljima:

  1. Potvrda dijagnoze pozitivnim kvalitativnim PCR-om i otkrivanje specifičnih antitijela.
  2. U slučaju kombinirane virusne patologije (virus hepatitisa C često se "pridružuje" hepatitisu B koji se prenosi na iste načine).
  3. Praćenje učinkovitosti terapije. Da biste to učinili, saznajte razinu viremije prije liječenja, a zatim nakon 4, 12, 24 tjedna terapije. Ako se u 12 tjedana razina virusa ne smanji za dvije logaritamske jedinice, tada je lijek odabran pogrešno.
  4. Dijagnoza prijelaza iz akutne u kroničnu.

Broj virusnih jedinica izračunava se po jedinici volumena ispitne tekućine (obično 1 ml). Rezultat je izražen u IU / ml ili u broju primjeraka RNA virusa u 1 ml.

Prikazuje intenzitet virusnog opterećenja na tijelu. Što je ta vrijednost veća, to je veća vjerojatnost prenošenja virusa drugim ljudima. Težina oštećenja jetre ne ovisi o razini viremije. Za to postoje brojni, takozvani, testovi jetre..

Priprema studije

Većina lažno negativnih analiza rezultat je neusklađenosti s tehnologijom analize. Da biste to izbjegli, morate se pridržavati sljedećih pravila:

  1. Potpuno isključiti nečistoće iz biomaterijala (apsolutni uvjeti sterilnosti).
  2. Minimalna koncentracija heparina u krvi, koja se koristi za sprečavanje koagulacije ili je pacijentu propisana u terapeutske svrhe, utječe na rezultat PCR-a. Važno je razjasniti ovo pitanje kod pacijenta.
  3. Spriječite tvari iz okoliša koje neutraliziraju enzime u PCR ispitnim sustavima.

Svi ovi zahtjevi odnose se na aktivnosti laboratorijskih pomoćnika i liječnika. Pacijent se ne treba posebno pripremati. Obično daju krv na prazan želudac, isključuju alkohol.

Prednosti PCR-a

U sveobuhvatnom pregledu na hepatitis C, lančana reakcija polimeraze na prvom je mjestu zbog niza prednosti:

  1. Izravna izolacija patogena s mogućnošću identificiranja njegove podvrste. U ostalim slučajevima (serološke reakcije) ispituje se odgovor imunološkog sustava na virus..
  2. Visoka specifičnost tehnike. Vjerojatnost dobivanja lažnih pozitivnih ili lažno negativnih rezultata je svedena na minimum (uglavnom kada postoji kršenje tehnologije ispitivanja).
  3. Visoka osjetljivost. Većina laboratorija i ispitnih sustava osigurava osjetljivost od najmanje 50 IU / ml. Postoji ultra PCR u kojem ta brojka iznosi 10 IU / ml. To znači da se virus hepatitisa C može otkriti u prvim danima infekcije..
  4. Univerzalnost. PCR-om se otkriva nekoliko patogena hepatitisa odmah, ako ih ima.

VAŽNO! Virusi s velikom varijabilnošću genotipa (hepatitis C, gripa) "zbunjuju" imunološki sustav, što dovodi do nejasnih pokazatelja seroloških testova (otkrivanje specifičnih antitijela). Samo PCR daje točan odgovor o prisutnosti genotipa patogena u tijelu.

Tumačenje rezultata

PCR za hepatitis C obično se provodi nakon seroloških ispitivanja na antitijela. Za pacijente je najteže tumačenje kvantitativne verzije metode. Pokušajmo to shvatiti..

Ako je rezultat prikazan u IU / ml, tada su rezultati opisani kako slijedi (podaci su za rusku opremu i ispitne sustave):

Količina virusne RNATumačenje
Nije otkrivenNorma (u nedostatku drugih kliničkih ili laboratorijskih znakova) ili količina virusa ispod praga osjetljivosti ove metode
Manje od 1,5 x 10 3Broj je "ispod linearnog raspona", što znači prisutnost patogena u tijelu, ali bez mogućnosti kvantitativnog opisa virusnog opterećenja
Manje od 4 x 10 6Otkrivena virusna RNA, viremija niska (prognoza je povoljna)
Više od 4 x 10 6Otkrivena virusna RNA, visoka viremija
Više od 2 x 10 8Koncentracija je visoka, iznad linearnog raspona, što znači vrlo veliko virusno opterećenje, što ne opisuju moderni mjerni instrumenti (nepovoljna prognoza).

Tablica prikazuje mogućnost interpretacije samo jedne verzije ruskih ispitnih sustava. Svaki laboratorij može koristiti vlastitu opremu, što daje razlike u vrijednostima. Obično se rezultat izdaje ili sa spremnim dekodiranjem, ili označavajući granice normalnih vrijednosti.

Značajke interpretacije PCR-a

Vrijeme početka liječenja ovisi o ispravnoj interpretaciji rezultata analize, što je u slučaju hepatitisa C od vitalnog značaja za pacijenta.

Postoji nekoliko čimbenika koji utječu na dekodiranje rezultata analize:

  • Kvaliteta opreme i osjetljivost ispitnih sustava. Do danas su najčešći Cobas Ampicolor HCV test i RealBest HCV RNA. Njihova osjetljivost nije manja od 50 IU / ml. To znači da ako je virus prisutan u nižoj koncentraciji (na primjer, u prvim danima infekcije), rezultat studije će biti negativan, a bolest će napredovati bez liječenja. U novije vrijeme pojavili su se ultra osjetljivi dijagnostički sustavi (najmanje 10 IU / ml). Oni značajno poboljšavaju kvalitetu dijagnoze. Trošak takvog PCR-a uvelike varira - od 1800 do 10 tisuća rubalja, ovisno o laboratoriju.
  • Konačna dijagnoza postavlja se tek nakon tri različita istraživanja biološke tekućine. Ako je rezultat tri puta negativan, tada u tijelu pacijenta nema virusa hepatitisa C.
  • Za uspješno liječenje potrebno je ne samo potvrditi činjenicu zaraze virusom, već i odrediti njegovu podvrstu: 1a, 1c, 2a, 2c, 2c, 3, 4, 5a, 6.
  • Rezultati se ocjenjuju u dvije jedinice: ME / ml i broj kopija RNA / ml. Njihov se broj razlikuje točno 4 puta, čega se morate prisjetiti prilikom primanja rezultata analize.

Tumačenje reakcije PCR na virusni hepatitis C trebali bi provesti stručnjaci. Liječnik razumije kvantitativne pokazatelje i može usporediti podudaranje rezultata laboratorija s kliničkom slikom.

Ponekad postoje lažno pozitivne ili lažno negativne mogućnosti ispitivanja, a samo sveobuhvatan pregled pacijenta omogućuje vam da "ne propustite" ovu najozbiljniju bolest jetre.

PCR analiza hepatitisa C (hepatitis C RNA)

PCR analiza

Kvalitativna analiza pokazuje prisutnost virusa u krvi. Ovaj test treba obaviti na svim pacijentima kod kojih su otkrivena antitijela na hepatitis C. Njegov rezultat može biti "otkriven" ili "nije otkriven". Referentne vrijednosti (vrijednost koja bi trebala biti normalna) "nisu otkrivene". Rezultat "otkriven" može ukazivati ​​na to da se virus umnožava i inficira sve nove stanice jetre. Kvalitativni PCR test ima određenu osjetljivost (10-500 IU / ml.). To znači da ako je virus prisutan u krvi u vrlo niskoj koncentraciji (ispod praga osjetljivosti metode), može se dobiti rezultat "nije otkriven". Stoga je kod provođenja visokokvalitetnog PCR-a u bolesnika s niskom viremijom (koncentracija virusa), na primjer, na antivirusnoj terapiji, važno znati osjetljivost dijagnostičkog sustava. Za kontrolu virološkog odgovora tijekom antivirusne terapije, prikladno je koristiti dijagnostički sustav s osjetljivošću od najmanje 50 IU / ml. Na primjer, COBAS AMPLICOR HCV-TEST analizatori (analitička osjetljivost 50 IU / ml ili 100 kopija / ml), RealBest HCV RNA (analitička osjetljivost 15 IU / ml ili 38 kopija / ml) i drugi.

Gdje je sigurno kupiti nove lijekove protiv hepatitisa C? Prema našem mišljenju, najoptimalniji i najpouzdaniji način je da se godinama na našem forumu koriste usluge provjerenih dobavljača koji su stotinama pacijenata već pomogli da se riješe ove bolesti.

PCR trošak

PCR analiza, čija cijena ovisi o korištenim reagensima, a može se kretati od 300 rubalja. do 5000 rubalja., obavlja se od jednog dana do tjedna.

Uz PCR metodu, metoda otkrivanja transkripcije (TMA) koristi se i za otkrivanje HCV RNA koja ima bolju osjetljivost (oko 5-10 IU / ml), ali ova metoda još nije široko rasprostranjena u Rusiji.

Koliko često trebate napraviti PCR hepatitisa C? Obično se provodi odmah nakon otkrivanja protutijela na hepatitis C i nakon 4., 12., 24. tjedna antivirusne terapije, kao i 24 tjedna nakon završetka OEM-a, a zatim godišnje, u slučaju SVR-a.

Sl. 1. Primjer rezultata visokokvalitetnog PCR hepatitisa C.

Kvantitativna analiza PCR (virusno opterećenje) je test za koncentraciju virusa (viremija) u krvi. Virusno opterećenje je broj jedinica genetskog materijala (virusna RNA) koji je prisutan u specifičnom volumenu krvi (obično 1 ml, što odgovara 1 kubnom centimetru). Ova količina izražena je u brojevima, mjernim jedinicama ME / ml (međunarodne jedinice po mililitru). Količina virusa može se prikazati na različite načine. Na primjer, 1,5 milijuna IU / ml, što odgovara 1.500.000 IU / ml ili 1.5 * 10 6 IU / ml. U nekim se laboratorijima koriste i druge mjerne jedinice - kopije / ml. Stopa konverzije iz kopija u međunarodne jedinice različita je za različite testne sustave. Približne vrijednosti mogu se izračunati u skladu s formulom 1 IU / ml = 4 kopije / ml, na primjer 5,5 * 10 5 IU / ml = 2,2 * 10 6 kopija / ml.

Što virusno opterećenje utječe??

Prvo, o infektivnosti. Što je veća koncentracija virusa, to je veći rizik od prijenosa virusa, na primjer, seksualnim kontaktom ili vertikalno. Drugo, koncentracija virusa utječe na učinkovitost liječenja (ako se liječenje provodi na osnovi interferona). Stoga je nisko virusno opterećenje povoljan čimbenik tijekom liječenja i vrlo visoki štetni čimbenik. Također je kvantitativni PCR od velike važnosti za provođenje terapije interferonom za procjenu njegovog uspjeha i planiranje trajanja tečaja. Dakle, brzim odgovorom na liječenje i niskom viremijom prije terapije, vrijeme liječenja može se skratiti. Suprotno tome, s sporim smanjenjem koncentracije virusa, AVT se može proširiti.

Koje opterećenje se smatra malim, a koje veliko?

Visoko se smatra opterećenjem većim od 800 * 10 3 ili 800 000 ME / ml, što je otprilike 300 * 10 4 ili 3 000 000 primjeraka / ml. Opterećenje iznad 1 * 10 7 ME / ml smatra se vrlo velikim. Međutim, zasad ne postoji opće mišljenje među stručnjacima o vrijednostima koje razlikuju visoku i nisku viremiju. Dakle, u nekim radovima ta brojka je 400.000 ME / ml..

Koliko često trebate napraviti kvantitativni test??

Obično se provodi prije liječenja i nakon 12. tjedna liječenja radi procjene njegove učinkovitosti ako se RNA ipak utvrdi kvalitativnim testom..

Rezultat kvantitativnog testa može biti kvantitativna procjena viremije u gore opisanom obliku, kao i rezultati "ispod mjernog područja" i "nije otkriveno".

Prag osjetljivosti kvantitativnog PCR-a obično je viši od kvalitativnog. Dakle, za sustav COBAS AMPLICOR iznosi 600 ME / ml. Rezultat "nije otkriven" može značiti da kvantitativni test i potvrđujući kvalitativni test nisu otkrili virusnu RNA. Rezultat "ispod mjernog raspona" znači da kvantitativni test nije otkrio RNA hepatitisa C, ali je virus prisutan u vrlo niskoj koncentraciji (ako se istodobno izvrši dodatni potvrdni kvalitativni test).

Slika 2 Primjer kvantitativnog rezultata ispitivanja..

PCR analiza za hepatitis C

Hepatitis C je ozbiljna bolest koja uništava jetru. Može dovesti do ciroze jetre. Između početka bolesti i trenutka kada se počnu stvarati antitijela može proći i do šest mjeseci, tako da je nemoguće dijagnosticirati bolest primjenom enzimski povezanog imunosorbenta. Pravodobna analiza bolesti i početak liječenja pomoći će analizi PCR na hepatitis C.

Indikacije za studiju

Kad trebate proći analizu:

  • ako je imunološki test enzima dao pozitivan rezultat;
  • pacijent ima simptome ciroze ili oštećenja jetre: mijenja se u veličini, slezina postaje veća, proširene vene su vidljive u trbuhu, koža postaje žuta, bolovi se primjećuju u desnoj strani trbuha;
  • povećava se aktivnost ALT i AST u krvnom testu;
  • prije početka liječenja, kako bi se utvrdila količina virusa u krvi zaražene osobe;
  • vidjeti koliko je terapija bila učinkovita. Nakon tretmana - za praćenje zdravlja i izbjegavanje recidiva;
  • ako je dijagnosticiran hepatitis B, da se isključi miješano oštećenje jetre;
  • nakon odnosa s osobom zaraženom hepatitisom.

Ciljevi ankete

Svrha PCR (ili lančane reakcije polimeraze) je ispitivanje sastava krvi i otkrivanje flavivirusa (hepatitis C). Značajna prednost ove analize je u tome što prepoznaje virus u fazi kada još nije započeo proces nepovratnih reakcija. PCR vam omogućuje da vidite koliko loše tijelo utječe, pokazuje kvalitativne karakteristike i određuje genotip virusa. Sve to vam omogućuje propisivanje najprikladnijeg liječenja za svaki određeni slučaj..

Raznolikosti analiza

PCR za otkrivanje hepatitisa C uključuje nekoliko studija:

  • kvalitativna analiza;
  • kvantitativna analiza;
  • genotipizacija.

Kvalitativna analiza

PCR se također naziva kvalitativnom analizom. Ako pokazuje negativan rezultat, tada je nemoguće prepoznati virus u tijelu, jer je njegov sadržaj manji nego što oprema može uhvatiti. U takvoj situaciji potrebno je utvrditi koliko je reagens osjetljiv kako bi se prilagodilo daljnje rješenje..

Analiza može pokazati pozitivan rezultat otprilike pet dana nakon što se osoba zarazila.

Kvantitativna analiza

Ova vrsta analize pokazuje razinu virusnog opterećenja, tj. Koncentracije flavivirusa u tijelu - koliko fragmenata virusa ima u 1 kubnom cm pacijentove krvi.

Ova vrsta PCR analize pacijentu je propisana prije početka antivirusne terapije, ili nakon tri mjeseca liječenja, kako bi se vidjelo koliko je učinkovit propisani tečaj..

Ova vrsta analize pokazuje:

  • koliko je velika opasnost od zaraze drugom osobom, ta je vjerojatnost izravno proporcionalna naznakama virusnog opterećenja;
  • koji je tretman u ovom slučaju prikladan i koliko će biti plodan;
  • trajanje liječenja - što je veća koncentracija virusa, to će terapija biti dulja.

Pacijent treba znati da ozbiljnost bolesti ne može ovisiti o razini virusnog opterećenja. Ponekad, čak i s velikom koncentracijom virusa u pacijentovoj krvi, jetra je samo malo oštećena. Međutim, ako trudnica ima visoku razinu virusnog opterećenja, vjerovatno je da će bolest prenijeti na svoje dijete.

Vjeruje se da je niža norma koncentracije virusa RNA do 600.000 IU / ml, prosječna od 600.000 do 700.000, visoka od 800.000 i viša.

genotipizacija

Zbog činjenice da je ovaj virus osjetljiv na velike mutacije, vrlo je važno utvrditi koji je genotip u krvi osobe tijekom ispitivanja. Ukupno postoji 11 genotipova hepatitisa C i mnoge su njihove podvrste. Ali u Rusiji su uobičajene samo tri: 1, 2 i 3.

Genotipiziranjem se može utvrditi otpornost virusa. O tome ovisi metoda liječenja..

Svi genotipovi hepatitisa C različito reagiraju na liječenje. 1 genotip se liječi najmanje godinu dana, a šansa za oporavak je oko 60%. Genotipovi 2 i 3 liječe se šest mjeseci, a vjerojatnost da se riješe bolesti je oko 85%.

Pored toga, genotipiziranje omogućava vidjeti u kakvom je stanju pacijentova jetra. Na primjer, nakupljanje masti u jetri ukazuje da pacijent pati od 3 genotipa virusa.

Krvni test u ovoj fazi pokazuje brojku koja karakterizira genotip. Povremeno nije moguće utvrditi genotip, a odgovori iz laboratorija ukazuju na „nije kucano“. To znači da osoba pati od genotipa koji nije čest na ovom zemljopisnom području. Da biste ga otkrili, morat ćete ponovo proći analizu, ali s dijagnostičkim sustavom koji to može prepoznati.

Postupak dešifriranja

U PCR analizama za hepatitis C dobivene iz laboratorija obično se naznače određeni podaci, a možete ih i sami dešifrirati:

  • otkriveno / nije otkriveno (kvalitativna analiza);
  • broj virusa (kvantitativna analiza);
  • genotip broj;
  • naziv testa.

Vjeruje se da se najviše pozornosti treba obratiti na drugu točku, jer na temelju tih pokazatelja možete napraviti prognozu, odrediti trajanje liječenja i njegovu vrstu.

Unatoč jasnoći analize, ne možete samostalno dijagnosticirati i samo-liječiti, rezultati analize moraju biti prikazani dežurnom liječniku.

Kako se pripremiti za analizu

Da biste dobili pouzdan rezultat, važno je poštivati ​​brojna pravila:

  1. Vrijedno je uzeti testove ujutro na prazan stomak (pokušajte jesti posljednji put najmanje 8 sati prije postupka).
  2. Prije darivanja krvi ne pijte ništa osim vode.
  3. Dva dana za uklanjanje masne i pržene hrane, kao i alkohola.
  4. Barem sat vremena bolje je odustati od cigareta.
  5. Ne preporučuje se uzimanje testova nakon masaže, ultrazvuka ili rendgenskih zraka.
  6. Dan prije pregleda pacijent bi trebao napustiti lijekove, fizičku aktivnost i emocionalni stres.
  7. Pola sata prije pregleda trebao bi biti miran i opušten..

Na brzinu PCR ispitivanja utječe od vrste virusa od kojeg pacijent pati i kojom se metodom krvi vrši test. Ovisno o složenosti, pacijent može dobiti rezultate ispitivanja za nekoliko sati ili nekoliko dana. Ali obično to ne traje više od 7 dana.

Na cijenu PCR testa utječe status klinike, kamo će pacijent ići i koliko će analiza biti teška. Cijena varira od 400 rubalja do 11 tisuća.

Važno je da pacijent zna da postoje takve stvari kao negativni lažni testovi. To se može dogoditi ako je krv za analizu napravljena pogrešno, kršeći pravila, ili je prevezena na neodgovarajući način (na primjer, u laboratorij je stigla više od dva sata nakon uzimanja). U takvoj situaciji pacijent riskira steći lažni dojam o svom zdravstvenom stanju i izgubiti dragocjeno vrijeme.

Stoga je izuzetno važno odabrati najprikladniju kliniku koja brine o svom ugledu i ne može priuštiti zanemarivanje pacijenata. Prije donošenja odluke, vrijedno je pročitati recenzije o ustanovi i njenom osoblju. Izbor je bolje zaustaviti na prestižnoj i dobro poznatoj klinici - vjerojatnost pogreške u ovom slučaju bit će mala.

PCR dijagnoza hepatitisa

Cijene za PCR dijagnostiku hepatitisa

  • Određivanje genotipa virusa hepatitisa C (HepAtitis C virus) 1660 rub.
  • Određivanje DNA virusa hepatitisa B (HepAtitis B virusa) u krvi PCR-om, kvalitativna studija od 520 rubalja.
  • Određivanje DNK virusa hepatitisa B (HepAtitis B virusa) u krvi PCR-om, kvantitativno istraživanje 1560 rub.
  • Određivanje RNA virusa hepatitisa C (HepAtitis C virusa) u krvi PCR-om, kvalitativna studija 570 rub.
  • Određivanje RNA virusa hepatitisa C (HepAtitis C virusa) u krvi PCR-om, kvantitativno istraživanje 2600 rub.

Lančana reakcija polimeraze (PCR) jedna je od dijagnostičkih metoda kojom se postiže značajno povećanje malih koncentracija određenih fragmenata nukleinske kiseline (DNA / RNA) u biološkom materijalu (uzorak) pomoću enzima DNK polimeraza.

Prema Svjetskoj zdravstvenoj organizaciji više od 2 milijarde ljudi zaraženo je virusom hepatitisa B (HBV); broj kroničnih nositelja virusa doseže 400 milijuna ljudi. Oko 50 milijuna ljudi zarazi se HBV-om svake godine, oko 2 milijuna ih umre. Oko 500 milijuna ljudi je zaraženo virusom hepatitisa C (HCV). Dakle, u ovom trenutku postoji prilično nepovoljna epidemiološka situacija za infekcije koje uzrokuju hepatitis B i hepatitis C.

S tim u vezi, primjereno je koristiti dijagnostičke metode za ove infekcije, koje bi trebale zadovoljiti sljedeće karakteristike:

- dobivanje rezultata analize što je prije moguće;

- visoka specifičnost i osjetljivost kao preduvjet pouzdanosti analize.

PCR rješava sljedeće zadatke:

- dijagnoza infekcija u najranijim fazama bolesti (tijekom razdoblja seronegativnog prozora);

- ukazuje na odsutnost virusa u krvi s nesigurnim rezultatima enzimske imunološke analize;

- otkriva istinske prenositelje virusa među seropozitivnim pojedincima;

- omogućuje vam određivanje genotipa virusa hepatitisa C (1a, 1b, 2,3a / 3b).

PCR omogućava određivanje DNA virusa hepatitisa B ili RNA virusa hepatitisa C u ispitivanom materijalu (krv, jetra) kao i kvalitativno i kvantitativno.

Pozitivna analiza ukazuje na akutni ili kronični hepatitis, negativan rezultat - nema infekcije.

indikacije

  • S povećanjem biokemijske analize razine AlAT i AsAT u krvi
  • Pregled u pripremi za trudnoću ili operaciju
  • Ispitivanje pacijenata kojima se često daju intravenske injekcije
  • S nezaštićenim seksualnim kontaktom
  • ovisnost
  • U prisutnosti znakova virusnog hepatitisa
  • Stagnacija žuči (kolestaza)

Metodologija

Za dijagnozu hepatitisa koristi se PCR metoda u stvarnom vremenu na analizatoru DT-96, reagensi tvrtke DNA tehnologija.

Trening

Posebna priprema za analizu nije potrebna. Preporučuje se suzdržati se od jela 4 sata prije uzorkovanja krvi.

Studija se može provesti 2 tjedna nakon procijenjenog vremena infekcije, što omogućava ranu dijagnozu bolesti.

Zahvaljujući liječniku na operaciji, s lakoćom sam legao na operativni stol i pod njegovom podrškom i zaspao sam, nije bilo strašno, hvala vam puno na obavljenom poslu. Više detalja

Izražavam duboku zahvalnost divnom liječniku Titovu Dmitriju Aleksejeviču na liječenju, na pažljivom stavu i profesionalizmu! Hvala vam na pozitivnom stavu tijekom cijelog tretmana. Više detalja

Liječena sam na Odjelu IX / 2019-II / 2020, želim izraziti duboku zahvalnost cijelom timu Odjela za antitumorsku terapiju lijekovima pod vodstvom divne, osjetljive liječnice Shikine Valentine Evgenievne. Zahvaljujući atmosferi stvorenoj u Odjelu, vrlo teško postupanje preneseno je moralno lako! Hvala na profesionalizmu, imajte na umu. Više detalja

Iskreno zahvaljujem vrlo dobrom liječniku Pavlu Jurijeviču Orehovu. Tako se dogodilo da sam zbog raznih dijagnoza morao biti podvrgnut liječenju na odjelu vaskularne kirurgije, a Pavel Yurievich bio je moj liječnik. Siguran sam da su to profesionalni postupci, sastanci i preporučuje se. Više detalja

Strašan liječnik. Puno vam hvala na svemu, vrlo kompetentna, pažljiva, a sada vrlo rijetko u našoj medicini, ona želi izliječiti pacijenta i pomoći mu, a ne samo razgovarati. Moj suprug i ja smo joj pacijenti i vrlo nam je drago što nas je sudbina spojila s tako divnim liječnikom. Hvala. Više detalja

Želim izraziti duboku zahvalnost Yevgeny Yuryevich Khlopushin za njegov profesionalizam i neobično osjetljiv stav. Liječnik je mojoj situaciji pristupio vrlo kompetentno i sveobuhvatno: postavio je kompletnu dijagnozu i u najkraćem mogućem roku organizirao potrebni predoperativni tretman. Sjajno je izveo složenu operaciju, nakon koje sam gotovo tjedan dana kasnije bio u mogućnosti. Više detalja

Izražavam duboku zahvalnost onkološkom kirurgu dr. Isščenku Romanu Viktoroviču za njegovo ljubazno srce, najviši profesionalizam i osjetljiv odnos prema pacijentima. Zahvaljujem sudbini što smo saznali o ovom divnom liječniku kroz program Zdravlje. Roman Viktorovich pomogao nam je da se nosimo s našim problemom. Operacija koju je izveo moj muž o lakoj prošlosti. Više detalja

Veliko hvala liječniku-koloproktologu Zinovskom Mihaelu Vjačeslavoviču. Bio je na prijemu 11. ožujka 2020. godine. Akutna bol jedva je dosegla sa suprugom, iako samo preko puta. Učinio je sve, čini mi se, najbolje. Dao je sve potrebne preporuke i svoj broj telefona. Rekao je da nazovem ako bude bilo kakvih pitanja. Nazvao sam i posavjetovao se s njim. Više detalja

U veljači 2020. završio sam na onkološkom odjelu, gdje me je dočekala šefica odjela Kosy Valentina Vasilievna. Puno vam hvala na profesionalnosti i osjetljivom stavu. Ovdje sam podvrgnut najkompliciranijoj operaciji Ischenko Roman Viktorovich i Astakhov Dmitry Anatolyevich. Ovo su moja tri anđela spasitelja.
Sada se brzo oporavljam. Više detalja

Izražavam duboku zahvalnost Arthuru Robertovichu za njegovu profesionalnost i "zlatne" ruke. Operisao je majku dva puta u lipnju 2019. i u veljači 2020., a oba puta uspješno. Vrlo pažljiv, osjetljiv i susretljiv doktor. Vrlo uredan u svom radu i to je ugodilo "esteti" u pogledu šavova))) Doslovno mi je spasio život. Pročitajte više

Prijavite se za hospitalizaciju ili istraživanje.
Recepcionari će vas kontaktirati i dogovoriti se
vrijeme koje je za vas povoljno. Ili idite na internetski obrazac za prijavu.

Virus hepatitisa C, RNA (HCV, PCR) plazma, kvaliteta.

S virusom hepatitisa

Virus hepatitisa C

Informacije o studiji

Hepatitis C je infektivna bolest jetre koja uzrokuje virus HCV. Virus hepatitisa C umnožava se u krvnim stanicama i inficira stanice jetre. Virus se prenosi nezaštićenim seksom, kontaktom s krvlju (na primjer, tijekom medicinskih postupaka, transfuzijom krvi, upotrebom jedne šprice itd.), S majke na dijete tijekom trudnoće ili poroda. Studija otkriva prisutnost virusa u krvi nakon 5-20 dana nakon moguće infekcije.

Otkrivanje uzročnika hepatitisa C (HCV) događa se pomoću metode lančane reakcije polimerazom u stvarnom vremenu. Utvrđuje se prisutnost genetskog materijala (RNA) virusa u krvi.

Među svim uzročnicima virusnih hepatitisa, HCV ima najveći broj varijacija, a zahvaljujući visokoj mutacijskoj aktivnosti uspijeva izbjeći zaštitne mehanizme ljudskog imunološkog sustava. Postoji 6 genotipova i mnogo podtipova virusa koji imaju različita značenja za prognozu bolesti i učinkovitost antivirusne terapije.
Hepatitis C prenosi se krvlju i tjelesnim tekućinama parenteralnim, seksualnim i transplacentnim putevima. Grupu visokog rizika čine ljudi koji prakticiraju intravensko zlouporabu droga, promiskuitetni seksualni odnos, kao i medicinski radnici, pacijenti kojima treba hemodijaliza ili transfuzija krvi, zatvorenici. Prodirejući u tijelo, HCV ulazi u krvne makrofage i hepatocite jetre, gdje dolazi do njegove replikacije. Do oštećenja jetre dolazi uglavnom zbog lize imunološkog sustava, a virus ima i izravan citopatski učinak. Sličnost antigena virusa s antigenima ljudskog sustava histokompatibilnosti uzrokuje pojavu autoimunih ("sistemskih") reakcija. U programu sistemskih manifestacija HCV infekcije mogu se pojaviti autoimuni tiroiditis, Sjogrenov sindrom, ideopatski trombocitopenična purpura, glomerulonefritis, reumatoidni artritis itd. U usporedbi s drugim virusnim hepatitisom, hepatitis C ima manje živopisnu kliničku sliku, češće postaje kroničan. U 20 - 50% slučajeva, kronični hepatitis C dovodi do razvoja ciroze jetre, a u 1,25 - 2,50% - do razvoja hepatocelularnog karcinoma. Autoimune komplikacije javljaju se s velikom učestalošću.

Period inkubacije je 5 do 20 dana. Na kraju razdoblja inkubacije povećavaju se razine jetrenih transaminaza, što je moguće povećanje jetre i slezene. Akutno razdoblje prolazi slabošću, gubitkom apetita. U trećini slučajeva pojavljuju se groznica, artralgija, polimorfni osip. Moguće su dispeptične pojave i polineuropatije. Kolestaza je izuzetno rijetka..

Indikacije u svrhu ispitivanja

Priprema studije

Uz ovu studiju, najam

  • 20.79. AT i AH za HIV 1/2 (probir, kval.)
  • 20.21. Hepatitis B, HBs Ag (kvalitetno)
  • 20,80. Zbir sifilisa. AT (IgG i IgM) (kvalitativno)
  • 20,118. Hepatitis A, anti-HAV zbroj. AT (računanje)
  • 3.9.1. Klinički test krvi s leukocitnom formulom i ESR-om (mikroskopijom krvnog mrlja kada su otkrivene patološke promjene) (venska krv)
  • 27,113. Biokemija 8 pokazatelja

Rezultati istraživanja

Čimbenici koji utječu na rezultate istraživanja

Tumačenje rezultata

  • „Pronađeno“: u analiziranom uzorku biološkog materijala pronađen je fragment RNA specifičan za virus hepatitisa C, infekciju virusom hepatitisa C.
  • "Nije otkriveno": fragment RNA specifičan za virus hepatitisa C ili koncentraciju RNA patogena u uzorku ispod granice osjetljivosti ispitivanja nije nađen u analiziranom uzorku biološkog materijala.