Vrste PCR-a za hepatitis B i interpretacija rezultata

Lančana reakcija polimeraze je vrsta krvne pretrage koja može precizno otkriti virus hepatitisa B. Karakteristika metode je ta da je u stanju pokazati HBV u ranim fazama - već mjesec dana nakon infekcije, dok se specifični antigen u bolesnika otkriva tek nakon 2 mjeseca, PCR može otkriti ne samo običan DNK virus, već i mutirane sojeve koje nijedna druga analiza ne može vidjeti.

Kod dekodiranja PCR-a za hepatitis B, rezultati se uspoređuju sa standardnim vrijednostima. Na temelju toga izvode se zaključci o prisutnosti bolesti (pozitivan rezultat), koncentraciji virusa (aktivnost) ili o odsutnosti bolesti (negativan rezultat). Obrada podataka traje 2 tjedna.

Vrste PCR-a za virusni hepatitis B

Postoje dvije vrste dijagnostike koje su propisane za hepatitis B. Visokokvalitetni PCR omogućava sa 100% točnošću reći da li je HBV prisutan u krvi ili ne. Kvantitativni PCR pokazuje aktivnost virusa, tj. Koliko fragmenata DNA HBV se nalazi u 1 ml krvi.

Visokokvalitetni PCR i njegova interpretacija

Krvni test za hepatitis B pomoću PCR može otkriti samo prisutnost fragmenata DNA. Propisan je ako pacijent sumnja na infekciju HBV-om (HBV) ili kada druge dijagnostičke metode, na primjer, serološki testovi ne daju jasan odgovor. Dešifriranje rezultata pri provođenju kvalitativne analize vrlo je jednostavno:

  • negativan rezultat - nema virusa;
  • otkriven pozitivan - virus.

Cilj visokokvalitetnog PCR-a je potvrditi ili poreći prisutnost virusa hepatitisa B, kao i provesti ranu dijagnozu. Ako se HBV otkrije unutar 1-2 tjedna nakon infekcije, liječenje će postati najučinkovitije. S aktivnim razvojem HBV-a tijekom dva mjeseca ili više, bolest postaje kronična i ne može se potpuno izliječiti.

U slučaju kada visokokvalitetni PCR za hepatitis ukazuje na prisutnost virusa, sljedeći korak je provođenje kvantitativne dijagnoze.

Kvantitativni PCR

Propisati učinkovit tretman ili procijeniti rezultate terapije, dovoljno je znati da pacijent ima HBV. Potrebno je kvantificirati vrijednost DNA virusa hepatitisa B u 1 ml krvi, odnosno virusnog opterećenja na tijelu. Ova vrsta PCR za hepatitis B provodi se u sljedećim slučajevima:

  1. Prije propisivanja liječenja.
  2. Za procjenu učinkovitosti terapije.
  3. Da bi se utvrdio razvoj otpornosti virusa na lijekove.
  4. Da biste odredili stadij u kojem je bolest.

Jedinice virusa su međunarodne jedinice (IU / ml) ili broj kopija DNK / ml, tj. Broj fragmenata DNA na 1 ml krvi. Omjer između dviju jedinica ovisi o odabranom ispitnom sustavu i kreće se od 2 do 7 kopija / ml u 1 IU / ml. Ako je sustav nepoznat, tada se za pretvaranje koristi prosječna vrijednost:

1 IU / ml = 5 primjeraka / ml

Ako se kvantitativna analiza napravi odmah, granična norma za dijagnosticiranje bolesti je 75 IU / ml. Uz rezultat iznad ovog pokazatelja, postavlja se dijagnoza HBV, ispod - HBV se ne otkriva.

Tumačenje kvantitativnog PCR-a

Kod hepatitisa B sljedeće vrijednosti virusnog opterećenja (viremija), kopije / ml, pojavljuju se kao PCR norme:

  • 10 ^ 5 primjeraka / ml. Kada se, uz veliku virusnu aktivnost, opazi porast razine ALT-a više od 2 puta u šest mjeseci, odmah se propisuje antivirusna terapija.

Da biste saznali kako će se DNA hepatitis ponašati u pogledu kronizacije, odnosno prelaska u kronični oblik iz akutnog, koriste se i rezultati PCR dijagnostike:

  • HBV DNA 2 x 10 ^ 6 kopija / ml znači da je stjecanje kroničnog oblika bolesti neizbježno.

Priprema za ispit

Da bi se utvrdila prisutnost HBV-a PCR-om, izvodi se krvni test iz vene. Postupak se uvijek provodi strogo na prazan želudac, a najbolje je doći u laboratorij ujutro kada je prirodno vrijeme odmora od hrane 8 sati. Da bi rezultati pregleda bili točni, morate unaprijed znati kako se pravilno pripremiti za put u kliniku. Dodatni koraci su sljedeći:

  1. Odbijanje masne hrane, pušenje, alkohol i sport 12 sati prije postupka.
  2. Odmarajte se 20 minuta neposredno prije davanja krvi.
  3. Prije početka postupka potrebno je upozoriti medicinsku sestru na uzete lijekove.

Pažnja! Ako se dijagnoza provodi kod djeteta mlađeg od 5 godina, tada je pola sata prije postupka potrebno piti u kuhanoj vodi u 1 čaši svakih 10 minuta.

Sažeti

Danas je PCR dijagnostika za otkrivanje hepatitisa B najpreciznija metoda. Metoda vam omogućuje da vidite skrivene i mutirane oblike bolesti, identificirate bolest u prvim tjednima nakon infekcije i, u skladu s tim, provedete učinkovito liječenje. Ovisno o situaciji, provodi se kvalitativni ili kvantitativni PCR koji su usmjereni na identifikaciju HBV-a i uspostavljanje njegove aktivnosti. Da biste ga pregledali, morate se obratiti virologu, specijalistu zaraznih bolesti ili hepatologu.

PCR za hepatitis C

PCR - moderna dijagnoza hepatitisa C

Virusni hepatitis C jedna je od najglupljih bolesti jetre. Dugo je asimptomatska, što dovodi do kroničnog procesa (u 80%). U većini slučajeva završava fibrozom jetre, prelazi u cirozu ili tumor organa.

Posebni značaj imaju metode rane dijagnoze bolesti. Polimerna lančana reakcija (PCR) omogućuje vam dijagnosticiranje nekoliko dana nakon infekcije.

Ukratko o virusnom hepatitisu C

Patogen - RNA koja sadrži virus koji ima nekoliko podvrsta. Prodire u ljudsko tijelo putem krvi: seksualno, transfuzijom krvi, injekcijama i drugim invazivnim medicinskim postupcima.

Akutni oblik bolesti nema značajnih simptoma. Ponekad postoji ozbiljnost u desnom hipohondriju, što većina pacijenata ne primjećuje.

Kronični oblik dovodi do kršenja svih funkcija jetre: intoksikacije, bolova u trbuhu, žutice, bolova u zglobovima i mnogih drugih. U ovom trenutku proces postaje nepovratan..

Često, kronični hepatitis C postaje prethodnica maligne degeneracije jetrenog tkiva.

Suština PCR metode

PCR-om se virusna RNA utvrđuje 5 dana nakon infekcije. Tijekom tog razdoblja, imunološki odgovor još nije pokrenut, rezultati serološkog testa bit će negativni, klinički simptomi su potpuno odsutni.

Upravo PCR dijagnostika omogućava postavljanje dijagnoze u ranoj fazi bolesti, kada adekvatno liječenje značajno poboljšava prognozu za pacijenta. Postoje dvije vrste PCR-a - kvalitativni i kvantitativni.

Tehnika kvalitete

Otkriva genetski materijal virusa hepatitisa C u minimalnoj količini. Rezultat je dvije vrste:

  1. "Otkriveno" - pozitivna reakcija, koja ukazuje na prisutnost bolesti kod ljudi.
  2. "Nije otkriveno" - negativna analiza, koja pokazuje odsutnost infekcije ili prisutnost virusa u tako malim količinama koje nije utvrđena ovom metodom. To ne daje stopostotnu vjerojatnost da pacijent nema virusni hepatitis C.

Krv se najčešće koristi za analizu, ali prikladna je i slina, sjemenska tekućina i druga biološka tekućina..

PCR za hepatitis C

Kvantitativna tehnika

Ovo je složenija i skuplja metoda koja se provodi prema određenim pokazateljima:

  1. Potvrda dijagnoze pozitivnim kvalitativnim PCR-om i otkrivanje specifičnih antitijela.
  2. U slučaju kombinirane virusne patologije (virus hepatitisa C često se "pridružuje" hepatitisu B koji se prenosi na iste načine).
  3. Praćenje učinkovitosti terapije. Da biste to učinili, saznajte razinu viremije prije liječenja, a zatim nakon 4, 12, 24 tjedna terapije. Ako se u 12 tjedana razina virusa ne smanji za dvije logaritamske jedinice, tada je lijek odabran pogrešno.
  4. Dijagnoza prijelaza iz akutne u kroničnu.

Broj virusnih jedinica izračunava se po jedinici volumena ispitne tekućine (obično 1 ml). Rezultat je izražen u IU / ml ili u broju primjeraka RNA virusa u 1 ml.

Prikazuje intenzitet virusnog opterećenja na tijelu. Što je ta vrijednost veća, to je veća vjerojatnost prenošenja virusa drugim ljudima. Težina oštećenja jetre ne ovisi o razini viremije. Za to postoje brojni, takozvani, testovi jetre..

Priprema studije

Većina lažno negativnih analiza rezultat je neusklađenosti s tehnologijom analize. Da biste to izbjegli, morate se pridržavati sljedećih pravila:

  1. Potpuno isključiti nečistoće iz biomaterijala (apsolutni uvjeti sterilnosti).
  2. Minimalna koncentracija heparina u krvi, koja se koristi za sprečavanje koagulacije ili je pacijentu propisana u terapeutske svrhe, utječe na rezultat PCR-a. Važno je razjasniti ovo pitanje kod pacijenta.
  3. Spriječite tvari iz okoliša koje neutraliziraju enzime u PCR ispitnim sustavima.

Svi ovi zahtjevi odnose se na aktivnosti laboratorijskih pomoćnika i liječnika. Pacijent se ne treba posebno pripremati. Obično daju krv na prazan želudac, isključuju alkohol.

Prednosti PCR-a

U sveobuhvatnom pregledu na hepatitis C, lančana reakcija polimeraze na prvom je mjestu zbog niza prednosti:

  1. Izravna izolacija patogena s mogućnošću identificiranja njegove podvrste. U ostalim slučajevima (serološke reakcije) ispituje se odgovor imunološkog sustava na virus..
  2. Visoka specifičnost tehnike. Vjerojatnost dobivanja lažnih pozitivnih ili lažno negativnih rezultata je svedena na minimum (uglavnom kada postoji kršenje tehnologije ispitivanja).
  3. Visoka osjetljivost. Većina laboratorija i ispitnih sustava osigurava osjetljivost od najmanje 50 IU / ml. Postoji ultra PCR u kojem ta brojka iznosi 10 IU / ml. To znači da se virus hepatitisa C može otkriti u prvim danima infekcije..
  4. Univerzalnost. PCR-om se otkriva nekoliko patogena hepatitisa odmah, ako ih ima.

VAŽNO! Virusi s velikom varijabilnošću genotipa (hepatitis C, gripa) "zbunjuju" imunološki sustav, što dovodi do nejasnih pokazatelja seroloških testova (otkrivanje specifičnih antitijela). Samo PCR daje točan odgovor o prisutnosti genotipa patogena u tijelu.

Tumačenje rezultata

PCR za hepatitis C obično se provodi nakon seroloških ispitivanja na antitijela. Za pacijente je najteže tumačenje kvantitativne verzije metode. Pokušajmo to shvatiti..

Ako je rezultat prikazan u IU / ml, tada su rezultati opisani kako slijedi (podaci su za rusku opremu i ispitne sustave):

Količina virusne RNATumačenje
Nije otkrivenNorma (u nedostatku drugih kliničkih ili laboratorijskih znakova) ili količina virusa ispod praga osjetljivosti ove metode
Manje od 1,5 x 10 3Broj je "ispod linearnog raspona", što znači prisutnost patogena u tijelu, ali bez mogućnosti kvantitativnog opisa virusnog opterećenja
Manje od 4 x 10 6Otkrivena virusna RNA, viremija niska (prognoza je povoljna)
Više od 4 x 10 6Otkrivena virusna RNA, visoka viremija
Više od 2 x 10 8Koncentracija je visoka, iznad linearnog raspona, što znači vrlo veliko virusno opterećenje, što ne opisuju moderni mjerni instrumenti (nepovoljna prognoza).

Tablica prikazuje mogućnost interpretacije samo jedne verzije ruskih ispitnih sustava. Svaki laboratorij može koristiti vlastitu opremu, što daje razlike u vrijednostima. Obično se rezultat izdaje ili sa spremnim dekodiranjem, ili označavajući granice normalnih vrijednosti.

Značajke interpretacije PCR-a

Vrijeme početka liječenja ovisi o ispravnoj interpretaciji rezultata analize, što je u slučaju hepatitisa C od vitalnog značaja za pacijenta.

Postoji nekoliko čimbenika koji utječu na dekodiranje rezultata analize:

  • Kvaliteta opreme i osjetljivost ispitnih sustava. Do danas su najčešći Cobas Ampicolor HCV test i RealBest HCV RNA. Njihova osjetljivost nije manja od 50 IU / ml. To znači da ako je virus prisutan u nižoj koncentraciji (na primjer, u prvim danima infekcije), rezultat studije će biti negativan, a bolest će napredovati bez liječenja. U novije vrijeme pojavili su se ultra osjetljivi dijagnostički sustavi (najmanje 10 IU / ml). Oni značajno poboljšavaju kvalitetu dijagnoze. Trošak takvog PCR-a uvelike varira - od 1800 do 10 tisuća rubalja, ovisno o laboratoriju.
  • Konačna dijagnoza postavlja se tek nakon tri različita istraživanja biološke tekućine. Ako je rezultat tri puta negativan, tada u tijelu pacijenta nema virusa hepatitisa C.
  • Za uspješno liječenje potrebno je ne samo potvrditi činjenicu zaraze virusom, već i odrediti njegovu podvrstu: 1a, 1c, 2a, 2c, 2c, 3, 4, 5a, 6.
  • Rezultati se ocjenjuju u dvije jedinice: ME / ml i broj kopija RNA / ml. Njihov se broj razlikuje točno 4 puta, čega se morate prisjetiti prilikom primanja rezultata analize.

Tumačenje reakcije PCR na virusni hepatitis C trebali bi provesti stručnjaci. Liječnik razumije kvantitativne pokazatelje i može usporediti podudaranje rezultata laboratorija s kliničkom slikom.

Ponekad postoje lažno pozitivne ili lažno negativne mogućnosti ispitivanja, a samo sveobuhvatan pregled pacijenta omogućuje vam da "ne propustite" ovu najozbiljniju bolest jetre.

Ispitivanja virusa hepatitisa B (ELISA i PCR)

Antigen virusa hepatitisa B "s" (HBsAg)

Površinski antigen hepatitisa B u serumu je normalno odsutan.
Otkrivanje površinskog antigena hepatitisa B (HBsAg) potvrđuje akutnu ili kroničnu infekciju virusom hepatitisa B.

U akutnoj bolesti HBsAg se otkriva u krvnom serumu u posljednja 1-2 tjedna inkubacijskog razdoblja i prva 2-3 tjedna kliničkog razdoblja. Cirkulacija HBsAg u krvi može biti ograničena na nekoliko dana, stoga biste trebali težiti ranom početnom pregledu pacijenata. Metoda ELISA može otkriti HBsAg u više od 90% bolesnika. U gotovo 5% bolesnika, najosjetljivije metode istraživanja ne otkrivaju HBsAg, u takvim slučajevima etiologija virusnog hepatitisa B potvrđuje se prisutnošću anti-HBcAg JgM ili PCR.

Koncentracija HBsAg u serumu za sve oblike težine hepatitisa B u visini bolesti ima značajan raspon fluktuacija, međutim postoji određeni obrazac: u akutnom razdoblju postoji obrnuta veza između koncentracije HBsAg u serumu i težine bolesti.

Visoka koncentracija HBsAg češće se opaža u blagim i umjerenim oblicima bolesti. U teškim i zloćudnim oblicima koncentracija HBsAg u krvi često je niska, a u 20% bolesnika s teškim oblikom i u 30% sa malignim antigenom antigen u krvi se uopće ne može otkriti. Pojava protutijela na HBsAg u bolesnika s ovom pozadinom smatra se nepovoljnim dijagnostičkim znakom; određuje se kod malignih oblika hepatitisa B.

U akutnom toku hepatitisa B koncentracija HBsAg u krvi postupno opada sve dok ovaj antigen u potpunosti ne nestane. HBsAg kod većine bolesnika nestaje u roku od 3 mjeseca od početka akutne infekcije.

Smanjenje koncentracije HBsAg za više od 50% do kraja 3. tjedna akutnog razdoblja u pravilu ukazuje na skoro završetak procesa infekcije. Tipično, kod pacijenata s visokom koncentracijom HBsAg u visini bolesti, otkriva se u krvi nekoliko mjeseci.
U bolesnika s niskom koncentracijom, HBsAg nestaje mnogo ranije (ponekad nekoliko dana nakon početka bolesti). Općenito, razdoblje otkrivanja HBsAg kreće se od nekoliko dana do 4-5 mjeseci. Maksimalno razdoblje otkrivanja HBsAg s glatkim tijekom akutnog hepatitisa B ne prelazi 6 mjeseci od početka bolesti.

HBsAg se može otkriti u zdravih pojedinaca, obično u profilaktičkim ili slučajnim studijama. U takvim slučajevima ispituju se drugi markeri virusnog hepatitisa B - proučava se anti HBcAg JgM, anti HBcAg JgG, anti HBeAg i funkcija jetre..

Ako je negativan, potrebno je ponoviti testiranje na HBsAg..
Ako ponovljeni krvni testovi duže od 3 mjeseca otkriju HBsAg, taj se bolesnik smatra bolesnikom s kroničnim virusnim hepatitisom B.
Prisutnost HBsAg prilično je česta pojava. U svijetu postoji više od 300 milijuna prijevoznika, a u našoj zemlji oko 10 milijuna prijevoznika.
Prestanak cirkulacije HBsAg praćen serokonverzijom (stvaranje anti-HBs) uvijek ukazuje na oporavak - reorganizaciju tijela.

Krvni test na prisustvo HBsAg koristi se u sljedeće svrhe:

za dijagnozu akutnog hepatitisa B:

  • trajanje inkubacije;
  • akutno razdoblje bolesti;
  • rana faza rekonvalescencije;

za dijagnozu kroničnog virusnog hepatitisa B;

za bolesti:

  • trajni kronični hepatitis;
  • ciroza jetre;

za probir i identifikaciju bolesnika u riziku:

  • pacijenti s čestim transfuzijama krvi;
  • pacijenti s kroničnim zatajenjem bubrega;
  • pacijenti s višestrukom hemodijalizom;
  • bolesnici s imunodeficijencijskim stanjima, uključujući AIDS.

Procjena rezultata studije

Rezultati studije izraženi su kvalitativno - pozitivno ili negativno. Negativni rezultat testa ukazuje na odsustvo seruma HBsAg. Pozitivan rezultat - otkrivanje HBsAg ukazuje na inkubaciju ili akutno razdoblje akutnog virusnog hepatitisa B, kao i kroničnog virusnog hepatitisa B.

Antitijela na nuklearni antigen virusa hepatitisa B JgG (anti-HBcAg JgG)

Normalni anti-HBcAg JgG u serumu nije prisutan.
U bolesnika se anti-HBcAg JgG pojavljuje u akutnom razdoblju virusnog hepatitisa B i traje kroz cijeli život. Anti-HBcAg JgG - vodeći marker HBV-a.

Krvni test na prisustvo anti-HBcAg JgG koristi se za dijagnozu:

  • kronični virusni hepatitis B u prisutnosti antigena HBs u serumu;
  • preneseni hepatitis B.
  • Procjena rezultata studije

    Rezultat studije izražen je kvalitativno - pozitivno ili negativno. Negativni rezultat testa ukazuje na odsutnost serumskog anti-HBcAg JgG. Pozitivan rezultat - otkrivanje anti-HBcAg JgG ukazuje na akutnu infekciju, rekonvalescenciju ili prethodno preneseni virusni hepatitis B.

    Antigen virusa hepatitisa B „e“ (HBeAg)

    Normalni HBeAg u serumu nije prisutan.
    HBeAg se može naći u krvnom serumu većine bolesnika s akutnim virusnim hepatitisom B. Obično nestaje u krvi prije antigena HBs. Visoka razina HBeAg u prvim tjednima bolesti ili otkrivanje iste više od 8 tjedana daje razlog za sumnju na kroničnu infekciju.

    Ovaj antigen se često nalazi u kroničnom aktivnom hepatitisu virusne etiologije. Poseban interes za određivanje HBeAg je činjenica da njegovo otkrivanje karakterizira aktivnu replikativnu fazu procesa infekcije. Utvrđeno je da visoke koncentracije HBeAg odgovaraju visokoj aktivnosti DNA polimeraze i karakteriziraju aktivnu replikaciju virusa.

    Prisutnost HBeAg u krvi ukazuje na njegovu visoku infektivnost, tj. prisutnost aktivne infekcije hepatitisom B u tijelu ispitanika, a otkriva se samo ako je antigen HBs prisutan u krvi. U bolesnika s kroničnim aktivnim hepatitisom, antivirusni lijekovi se koriste samo kada se HBeAg otkrije u krvi. HBeAg - antigen - marker akutne faze i replikacije virusa hepatitisa B.

    Krvni test na prisutnost HBe antigena koristi se za dijagnozu:

  • razdoblje inkubacije virusnog hepatitisa B;
  • prodromalni period virusnog hepatitisa B;
  • akutno razdoblje virusnog hepatitisa B;
  • kronični perzistentni virusni hepatitis B.
  • Procjena rezultata studije

    Rezultat studije izražen je kvalitativno - pozitivno ili negativno. Negativni rezultat testa ukazuje na odsustvo HBeAg u serumu. Pozitivan rezultat - otkrivanje HBeAg ukazuje na inkubaciju ili akutno razdoblje akutnog virusnog hepatitisa B ili stalnu replikaciju virusa i infektivnost pacijenta.

    Antitijela na antigen virusa hepatitisa B „e“ (anti-HBeAg)

    Anti-HBeAg u serumu normalno nedostaje. Pojava anti-HBeAg protutijela obično ukazuje na intenzivno uklanjanje virusa hepatitisa B iz tijela i laganu infekciju pacijenta.

    Ta se antitijela pojavljuju u akutnom razdoblju i traju do 5 godina nakon infekcije. U kroničnom perzistentnom hepatitisu, anti-HBeAg se nalazi u krvi pacijenta zajedno s HBsAg. Serokonverzija, tj. prijelaz HBeAg u anti-HBeAg, s kroničnim aktivnim hepatitisom, često je prognostički povoljan, ali ista serokonverzija s izraženom cirotičnom transformacijom jetre ne poboljšava prognozu.

    Krvni test na prisustvo anti-HBeAg koristi se u sljedećim slučajevima u dijagnozi virusnog hepatitisa B:

  • uspostavljanje početne faze bolesti;
  • akutno razdoblje infekcije;
  • rana faza rekonvalescencije;
  • oporavak;
  • kasni stadij rekonvalescencije.
  • dijagnoza nedavno prenesenog virusnog hepatitisa B;
  • dijagnoza kroničnog perzistentnog virusnog hepatitisa B.
  • Procjena rezultata studije

    Rezultat studije izražen je kvalitativno - pozitivno ili negativno. Negativni rezultat testa ukazuje na izostanak antitijela na HBeAg u serumu. Pozitivan rezultat je otkrivanje antitijela na HBeAg, što može ukazivati ​​na početni stadij akutnog virusnog hepatitisa B, akutno razdoblje infekcije, rani stadij rekonvalescencije, rekonvalescenciju, nedavni virusni hepatitis B ili trajni virusni hepatitis B.

    Kriteriji za prisutnost kroničnog hepatitisa B su:

  • otkrivanje ili periodično otkrivanje HBV DNA u krvi;
  • stalno ili periodično povećanje ALT / AST aktivnosti u krvi;
  • morfološki znakovi kroničnog hepatitisa u histološkom pregledu biopsije jetre.
  • Detekcija virusa hepatitisa B pomoću PCR-a (kvalitativno)

    Virus hepatitisa B u krvi je normalno odsutan.
    Kvalitativno određivanje virusa hepatitisa B pomoću PCR-a u krvi omogućuje vam da potvrdite prisutnost virusa u tijelu pacijenta i na taj način utvrdite etiologiju bolesti.

    Ovo istraživanje daje korisne informacije za dijagnozu akutnog virusnog hepatitisa B u inkubaciji i ranom razdoblju bolesti, kada glavni serološki biljezi u krvi pacijenta mogu izostati. Virusna DNK u serumu otkriva se u 50% bolesnika u nedostatku HBeAg. Analitička osjetljivost PCR metode je najmanje 80 virusnih čestica u 5 µl, koje su prošle otkrivanje DNA uzorka, specifičnost - 98%.

    Ova metoda je važna za dijagnozu i praćenje kroničnog HBV-a. Otprilike 5-10% slučajeva ciroze i drugih kroničnih bolesti jetre uzrokovano je kroničnim prijenosom virusa hepatitisa B. Oznake aktivnosti takvih bolesti su prisutnost HBeAg i DNA hepatitisa B u krvi.

    PCR metoda omogućuje određivanje DNA virusa hepatitisa B u krvi kvalitativno i kvantitativno. U oba slučaja prepoznatljivi fragment je jedinstveni slijed DNA strukturnog proteinskog gena virusa hepatitisa B.

    Otkrivanje DNA virusa hepatitisa B u biomaterijalu pomoću PCR-a potrebno je za:

  • rješavanje sumnjivih rezultata seroloških studija;
  • identifikacija akutne faze bolesti u usporedbi s infekcijom ili kontaktom;
  • praćenje učinkovitosti antivirusnog liječenja.
  • Nestanak DNA virusa hepatitisa B iz krvi je znak učinkovitosti terapije

    Detekcija virusa hepatitisa B pomoću PCR-a (kvantitativno)

    Ova metoda daje važne informacije o intenzitetu razvoja bolesti, o učinkovitosti liječenja i o razvoju otpornosti na aktivne lijekove..
    Za dijagnosticiranje virusnog hepatitisa PCR-om u krvnom serumu koriste se testni sustavi čija je osjetljivost 50-100 kopija u uzorku, što omogućava otkrivanje virusa u koncentraciji od 5 X 10 ^ 3 -10 ^ 4 kopije / ml. PCR za virusni hepatitis B sigurno je potreban za prosuđivanje replike virusa.

    Virusna DNK u serumu otkriva se u 50% bolesnika u nedostatku HBeAg. Materijal za otkrivanje DNA virusa hepatitisa B može biti serum krvi, limfociti, hepatobioptati.

    • Procjena razine viremije je sljedeća:
    • manje od 2,10 ^ 5 kopija / ml (manje od 2,10 ^ 5 IU / ml) - niska viremija;
    • od 2,10 ^ 5 kopija / ml (2,10 ^ 5 IU / ml) do 2,10 ^ 6 kopija / ml (8,10 ^ 5 IU / ml) - prosječna viremija;
    • više od 2,10 ^ 6 kopija / ml - visoka viremija.

    Postoji veza između ishoda akutnog virusnog hepatitisa B i koncentracije HBV DNA u pacijentovoj krvi. S niskom razinom viremije proces kronične infekcije je blizu nule, s prosjekom - kroničnost procesa opaža se kod 25-30% bolesnika, a s visokom razinom viremije, akutni virusni hepatitis B najčešće postaje kroničan.

    Indikacije za liječenje kroničnog HBV-a interferonom-alfa treba uzeti u obzir prisutnost markera aktivne replikacije virusa (otkrivanje HBsAg, HBeAg i HBV DNA u serumu tijekom prethodnih 6 mjeseci.).

    Kriteriji za procjenu učinkovitosti liječenja su nestanak HBeAg i HBV DNA u krvi, što obično prati normalizacija transaminaza i dugotrajna remisija bolesti, HBV DNK nestaje iz krvi do 5. mjeseca liječenja u 60%, do 9. mjeseca - u 80% bolesnika. Pad razine viremije za 85% ili više do trećeg dana od početka liječenja u usporedbi s početnim služi kao brzi i prilično točan kriterij za predviđanje učinkovitosti terapije.

    PCR analiza za hepatitis C

    Hepatitis C je ozbiljna bolest koja uništava jetru. Može dovesti do ciroze jetre. Između početka bolesti i trenutka kada se počnu stvarati antitijela može proći i do šest mjeseci, tako da je nemoguće dijagnosticirati bolest primjenom enzimski povezanog imunosorbenta. Pravodobna analiza bolesti i početak liječenja pomoći će analizi PCR na hepatitis C.

    Indikacije za studiju

    Kad trebate proći analizu:

    • ako je imunološki test enzima dao pozitivan rezultat;
    • pacijent ima simptome ciroze ili oštećenja jetre: mijenja se u veličini, slezina postaje veća, proširene vene su vidljive u trbuhu, koža postaje žuta, bolovi se primjećuju u desnoj strani trbuha;
    • povećava se aktivnost ALT i AST u krvnom testu;
    • prije početka liječenja, kako bi se utvrdila količina virusa u krvi zaražene osobe;
    • vidjeti koliko je terapija bila učinkovita. Nakon tretmana - za praćenje zdravlja i izbjegavanje recidiva;
    • ako je dijagnosticiran hepatitis B, da se isključi miješano oštećenje jetre;
    • nakon odnosa s osobom zaraženom hepatitisom.

    Ciljevi ankete

    Svrha PCR (ili lančane reakcije polimeraze) je ispitivanje sastava krvi i otkrivanje flavivirusa (hepatitis C). Značajna prednost ove analize je u tome što prepoznaje virus u fazi kada još nije započeo proces nepovratnih reakcija. PCR vam omogućuje da vidite koliko loše tijelo utječe, pokazuje kvalitativne karakteristike i određuje genotip virusa. Sve to vam omogućuje propisivanje najprikladnijeg liječenja za svaki određeni slučaj..

    Raznolikosti analiza

    PCR za otkrivanje hepatitisa C uključuje nekoliko studija:

    • kvalitativna analiza;
    • kvantitativna analiza;
    • genotipizacija.

    Kvalitativna analiza

    PCR se također naziva kvalitativnom analizom. Ako pokazuje negativan rezultat, tada je nemoguće prepoznati virus u tijelu, jer je njegov sadržaj manji nego što oprema može uhvatiti. U takvoj situaciji potrebno je utvrditi koliko je reagens osjetljiv kako bi se prilagodilo daljnje rješenje..

    Analiza može pokazati pozitivan rezultat otprilike pet dana nakon što se osoba zarazila.

    Kvantitativna analiza

    Ova vrsta analize pokazuje razinu virusnog opterećenja, tj. Koncentracije flavivirusa u tijelu - koliko fragmenata virusa ima u 1 kubnom cm pacijentove krvi.

    Ova vrsta PCR analize pacijentu je propisana prije početka antivirusne terapije, ili nakon tri mjeseca liječenja, kako bi se vidjelo koliko je učinkovit propisani tečaj..

    Ova vrsta analize pokazuje:

    • koliko je velika opasnost od zaraze drugom osobom, ta je vjerojatnost izravno proporcionalna naznakama virusnog opterećenja;
    • koji je tretman u ovom slučaju prikladan i koliko će biti plodan;
    • trajanje liječenja - što je veća koncentracija virusa, to će terapija biti dulja.

    Pacijent treba znati da ozbiljnost bolesti ne može ovisiti o razini virusnog opterećenja. Ponekad, čak i s velikom koncentracijom virusa u pacijentovoj krvi, jetra je samo malo oštećena. Međutim, ako trudnica ima visoku razinu virusnog opterećenja, vjerovatno je da će bolest prenijeti na svoje dijete.

    Vjeruje se da je niža norma koncentracije virusa RNA do 600.000 IU / ml, prosječna od 600.000 do 700.000, visoka od 800.000 i viša.

    genotipizacija

    Zbog činjenice da je ovaj virus osjetljiv na velike mutacije, vrlo je važno utvrditi koji je genotip u krvi osobe tijekom ispitivanja. Ukupno postoji 11 genotipova hepatitisa C i mnoge su njihove podvrste. Ali u Rusiji su uobičajene samo tri: 1, 2 i 3.

    Genotipiziranjem se može utvrditi otpornost virusa. O tome ovisi metoda liječenja..

    Svi genotipovi hepatitisa C različito reagiraju na liječenje. 1 genotip se liječi najmanje godinu dana, a šansa za oporavak je oko 60%. Genotipovi 2 i 3 liječe se šest mjeseci, a vjerojatnost da se riješe bolesti je oko 85%.

    Pored toga, genotipiziranje omogućava vidjeti u kakvom je stanju pacijentova jetra. Na primjer, nakupljanje masti u jetri ukazuje da pacijent pati od 3 genotipa virusa.

    Krvni test u ovoj fazi pokazuje brojku koja karakterizira genotip. Povremeno nije moguće utvrditi genotip, a odgovori iz laboratorija ukazuju na „nije kucano“. To znači da osoba pati od genotipa koji nije čest na ovom zemljopisnom području. Da biste ga otkrili, morat ćete ponovo proći analizu, ali s dijagnostičkim sustavom koji to može prepoznati.

    Postupak dešifriranja

    U PCR analizama za hepatitis C dobivene iz laboratorija obično se naznače određeni podaci, a možete ih i sami dešifrirati:

    • otkriveno / nije otkriveno (kvalitativna analiza);
    • broj virusa (kvantitativna analiza);
    • genotip broj;
    • naziv testa.

    Vjeruje se da se najviše pozornosti treba obratiti na drugu točku, jer na temelju tih pokazatelja možete napraviti prognozu, odrediti trajanje liječenja i njegovu vrstu.

    Unatoč jasnoći analize, ne možete samostalno dijagnosticirati i samo-liječiti, rezultati analize moraju biti prikazani dežurnom liječniku.

    Kako se pripremiti za analizu

    Da biste dobili pouzdan rezultat, važno je poštivati ​​brojna pravila:

    1. Vrijedno je uzeti testove ujutro na prazan stomak (pokušajte jesti posljednji put najmanje 8 sati prije postupka).
    2. Prije darivanja krvi ne pijte ništa osim vode.
    3. Dva dana za uklanjanje masne i pržene hrane, kao i alkohola.
    4. Barem sat vremena bolje je odustati od cigareta.
    5. Ne preporučuje se uzimanje testova nakon masaže, ultrazvuka ili rendgenskih zraka.
    6. Dan prije pregleda pacijent bi trebao napustiti lijekove, fizičku aktivnost i emocionalni stres.
    7. Pola sata prije pregleda trebao bi biti miran i opušten..

    Na brzinu PCR ispitivanja utječe od vrste virusa od kojeg pacijent pati i kojom se metodom krvi vrši test. Ovisno o složenosti, pacijent može dobiti rezultate ispitivanja za nekoliko sati ili nekoliko dana. Ali obično to ne traje više od 7 dana.

    Na cijenu PCR testa utječe status klinike, kamo će pacijent ići i koliko će analiza biti teška. Cijena varira od 400 rubalja do 11 tisuća.

    Važno je da pacijent zna da postoje takve stvari kao negativni lažni testovi. To se može dogoditi ako je krv za analizu napravljena pogrešno, kršeći pravila, ili je prevezena na neodgovarajući način (na primjer, u laboratorij je stigla više od dva sata nakon uzimanja). U takvoj situaciji pacijent riskira steći lažni dojam o svom zdravstvenom stanju i izgubiti dragocjeno vrijeme.

    Stoga je izuzetno važno odabrati najprikladniju kliniku koja brine o svom ugledu i ne može priuštiti zanemarivanje pacijenata. Prije donošenja odluke, vrijedno je pročitati recenzije o ustanovi i njenom osoblju. Izbor je bolje zaustaviti na prestižnoj i dobro poznatoj klinici - vjerojatnost pogreške u ovom slučaju bit će mala.

    PCR dijagnoza hepatitisa

    Cijene za PCR dijagnostiku hepatitisa

    • Određivanje genotipa virusa hepatitisa C (HepAtitis C virus) 1660 rub.
    • Određivanje DNA virusa hepatitisa B (HepAtitis B virusa) u krvi PCR-om, kvalitativna studija od 520 rubalja.
    • Određivanje DNK virusa hepatitisa B (HepAtitis B virusa) u krvi PCR-om, kvantitativno istraživanje 1560 rub.
    • Određivanje RNA virusa hepatitisa C (HepAtitis C virusa) u krvi PCR-om, kvalitativna studija 570 rub.
    • Određivanje RNA virusa hepatitisa C (HepAtitis C virusa) u krvi PCR-om, kvantitativno istraživanje 2600 rub.

    Lančana reakcija polimeraze (PCR) jedna je od dijagnostičkih metoda kojom se postiže značajno povećanje malih koncentracija određenih fragmenata nukleinske kiseline (DNA / RNA) u biološkom materijalu (uzorak) pomoću enzima DNK polimeraza.

    Prema Svjetskoj zdravstvenoj organizaciji više od 2 milijarde ljudi zaraženo je virusom hepatitisa B (HBV); broj kroničnih nositelja virusa doseže 400 milijuna ljudi. Oko 50 milijuna ljudi zarazi se HBV-om svake godine, oko 2 milijuna ih umre. Oko 500 milijuna ljudi je zaraženo virusom hepatitisa C (HCV). Dakle, u ovom trenutku postoji prilično nepovoljna epidemiološka situacija za infekcije koje uzrokuju hepatitis B i hepatitis C.

    S tim u vezi, primjereno je koristiti dijagnostičke metode za ove infekcije, koje bi trebale zadovoljiti sljedeće karakteristike:

    - dobivanje rezultata analize što je prije moguće;

    - visoka specifičnost i osjetljivost kao preduvjet pouzdanosti analize.

    PCR rješava sljedeće zadatke:

    - dijagnoza infekcija u najranijim fazama bolesti (tijekom razdoblja seronegativnog prozora);

    - ukazuje na odsutnost virusa u krvi s nesigurnim rezultatima enzimske imunološke analize;

    - otkriva istinske prenositelje virusa među seropozitivnim pojedincima;

    - omogućuje vam određivanje genotipa virusa hepatitisa C (1a, 1b, 2,3a / 3b).

    PCR omogućava određivanje DNA virusa hepatitisa B ili RNA virusa hepatitisa C u ispitivanom materijalu (krv, jetra) kao i kvalitativno i kvantitativno.

    Pozitivna analiza ukazuje na akutni ili kronični hepatitis, negativan rezultat - nema infekcije.

    indikacije

    • S povećanjem biokemijske analize razine AlAT i AsAT u krvi
    • Pregled u pripremi za trudnoću ili operaciju
    • Ispitivanje pacijenata kojima se često daju intravenske injekcije
    • S nezaštićenim seksualnim kontaktom
    • ovisnost
    • U prisutnosti znakova virusnog hepatitisa
    • Stagnacija žuči (kolestaza)

    Metodologija

    Za dijagnozu hepatitisa koristi se PCR metoda u stvarnom vremenu na analizatoru DT-96, reagensi tvrtke DNA tehnologija.

    Trening

    Posebna priprema za analizu nije potrebna. Preporučuje se suzdržati se od jela 4 sata prije uzorkovanja krvi.

    Studija se može provesti 2 tjedna nakon procijenjenog vremena infekcije, što omogućava ranu dijagnozu bolesti.

    Zahvaljujući liječniku na operaciji, s lakoćom sam legao na operativni stol i pod njegovom podrškom i zaspao sam, nije bilo strašno, hvala vam puno na obavljenom poslu. Više detalja

    Izražavam duboku zahvalnost divnom liječniku Titovu Dmitriju Aleksejeviču na liječenju, na pažljivom stavu i profesionalizmu! Hvala vam na pozitivnom stavu tijekom cijelog tretmana. Više detalja

    Liječena sam na Odjelu IX / 2019-II / 2020, želim izraziti duboku zahvalnost cijelom timu Odjela za antitumorsku terapiju lijekovima pod vodstvom divne, osjetljive liječnice Shikine Valentine Evgenievne. Zahvaljujući atmosferi stvorenoj u Odjelu, vrlo teško postupanje preneseno je moralno lako! Hvala na profesionalizmu, imajte na umu. Više detalja

    Iskreno zahvaljujem vrlo dobrom liječniku Pavlu Jurijeviču Orehovu. Tako se dogodilo da sam zbog raznih dijagnoza morao biti podvrgnut liječenju na odjelu vaskularne kirurgije, a Pavel Yurievich bio je moj liječnik. Siguran sam da su to profesionalni postupci, sastanci i preporučuje se. Više detalja

    Strašan liječnik. Puno vam hvala na svemu, vrlo kompetentna, pažljiva, a sada vrlo rijetko u našoj medicini, ona želi izliječiti pacijenta i pomoći mu, a ne samo razgovarati. Moj suprug i ja smo joj pacijenti i vrlo nam je drago što nas je sudbina spojila s tako divnim liječnikom. Hvala. Više detalja

    Želim izraziti duboku zahvalnost Yevgeny Yuryevich Khlopushin za njegov profesionalizam i neobično osjetljiv stav. Liječnik je mojoj situaciji pristupio vrlo kompetentno i sveobuhvatno: postavio je kompletnu dijagnozu i u najkraćem mogućem roku organizirao potrebni predoperativni tretman. Sjajno je izveo složenu operaciju, nakon koje sam gotovo tjedan dana kasnije bio u mogućnosti. Više detalja

    Izražavam duboku zahvalnost onkološkom kirurgu dr. Isščenku Romanu Viktoroviču za njegovo ljubazno srce, najviši profesionalizam i osjetljiv odnos prema pacijentima. Zahvaljujem sudbini što smo saznali o ovom divnom liječniku kroz program Zdravlje. Roman Viktorovich pomogao nam je da se nosimo s našim problemom. Operacija koju je izveo moj muž o lakoj prošlosti. Više detalja

    Veliko hvala liječniku-koloproktologu Zinovskom Mihaelu Vjačeslavoviču. Bio je na prijemu 11. ožujka 2020. godine. Akutna bol jedva je dosegla sa suprugom, iako samo preko puta. Učinio je sve, čini mi se, najbolje. Dao je sve potrebne preporuke i svoj broj telefona. Rekao je da nazovem ako bude bilo kakvih pitanja. Nazvao sam i posavjetovao se s njim. Više detalja

    U veljači 2020. završio sam na onkološkom odjelu, gdje me je dočekala šefica odjela Kosy Valentina Vasilievna. Puno vam hvala na profesionalnosti i osjetljivom stavu. Ovdje sam podvrgnut najkompliciranijoj operaciji Ischenko Roman Viktorovich i Astakhov Dmitry Anatolyevich. Ovo su moja tri anđela spasitelja.
    Sada se brzo oporavljam. Više detalja

    Izražavam duboku zahvalnost Arthuru Robertovichu za njegovu profesionalnost i "zlatne" ruke. Operisao je majku dva puta u lipnju 2019. i u veljači 2020., a oba puta uspješno. Vrlo pažljiv, osjetljiv i susretljiv doktor. Vrlo uredan u svom radu i to je ugodilo "esteti" u pogledu šavova))) Doslovno mi je spasio život. Pročitajte više

    Prijavite se za hospitalizaciju ili istraživanje.
    Recepcionari će vas kontaktirati i dogovoriti se
    vrijeme koje je za vas povoljno. Ili idite na internetski obrazac za prijavu.

    Virus hepatitisa C, definicija kvaliteti RNA. (HCV-RNA, kvalitativno) u krvnom serumu

    Određivanje RNA virusa hepatitisa C (HCV) u krvnom serumu polimeraznom lančanom reakcijom (PCR) s detekcijom u stvarnom vremenu.

    Identificirani fragment je specifično mjesto RNA virusa hepatitisa C. Identificirani genotipovi: 1a, 1b, 2a, 2b, 2c, 2i, 3, 4, 5a, 6, bez obzira na podtip. Specifičnost određivanja je 100%. Osjetljivost određivanja - 60 IU / ml.

    • Klinički znakovi hepatitisa.
    • Preventivne probirne studije (RNA hepatitisa C virus je najraniji biljeg akutne infekcije).
    • Kontaktirajte anketama.
    • Dijagnoza hepatitisa miješane etiologije - identifikacija vodećeg virusa.
    • Identifikacija faze aktivne replikacije virusa u kroničnom stanju.
    • Praćenje učinkovitosti terapije.
    • Ciroza jetre.

    Tumačenje rezultata istraživanja sadrži podatke za liječnika i nije dijagnoza. Podaci u ovom odjeljku ne mogu se koristiti za samo-dijagnosticiranje i samo-lijek. Liječnik postavlja točnu dijagnozu koristeći i rezultate ovog pregleda i potrebne podatke iz drugih izvora: anamnezu, rezultate drugih pregleda itd..

    Virus hepatitisa C, RNA (HCV, PCR) plazma, kvaliteta.

    S virusom hepatitisa

    Virus hepatitisa C

    Informacije o studiji

    Hepatitis C je infektivna bolest jetre koja uzrokuje virus HCV. Virus hepatitisa C umnožava se u krvnim stanicama i inficira stanice jetre. Virus se prenosi nezaštićenim seksom, kontaktom s krvlju (na primjer, tijekom medicinskih postupaka, transfuzijom krvi, upotrebom jedne šprice itd.), S majke na dijete tijekom trudnoće ili poroda. Studija otkriva prisutnost virusa u krvi nakon 5-20 dana nakon moguće infekcije.

    Otkrivanje uzročnika hepatitisa C (HCV) događa se pomoću metode lančane reakcije polimerazom u stvarnom vremenu. Utvrđuje se prisutnost genetskog materijala (RNA) virusa u krvi.

    Među svim uzročnicima virusnih hepatitisa, HCV ima najveći broj varijacija, a zahvaljujući visokoj mutacijskoj aktivnosti uspijeva izbjeći zaštitne mehanizme ljudskog imunološkog sustava. Postoji 6 genotipova i mnogo podtipova virusa koji imaju različita značenja za prognozu bolesti i učinkovitost antivirusne terapije.
    Hepatitis C prenosi se krvlju i tjelesnim tekućinama parenteralnim, seksualnim i transplacentnim putevima. Grupu visokog rizika čine ljudi koji prakticiraju intravensko zlouporabu droga, promiskuitetni seksualni odnos, kao i medicinski radnici, pacijenti kojima treba hemodijaliza ili transfuzija krvi, zatvorenici. Prodirejući u tijelo, HCV ulazi u krvne makrofage i hepatocite jetre, gdje dolazi do njegove replikacije. Do oštećenja jetre dolazi uglavnom zbog lize imunološkog sustava, a virus ima i izravan citopatski učinak. Sličnost antigena virusa s antigenima ljudskog sustava histokompatibilnosti uzrokuje pojavu autoimunih ("sistemskih") reakcija. U programu sistemskih manifestacija HCV infekcije mogu se pojaviti autoimuni tiroiditis, Sjogrenov sindrom, ideopatski trombocitopenična purpura, glomerulonefritis, reumatoidni artritis itd. U usporedbi s drugim virusnim hepatitisom, hepatitis C ima manje živopisnu kliničku sliku, češće postaje kroničan. U 20 - 50% slučajeva, kronični hepatitis C dovodi do razvoja ciroze jetre, a u 1,25 - 2,50% - do razvoja hepatocelularnog karcinoma. Autoimune komplikacije javljaju se s velikom učestalošću.

    Period inkubacije je 5 do 20 dana. Na kraju razdoblja inkubacije povećavaju se razine jetrenih transaminaza, što je moguće povećanje jetre i slezene. Akutno razdoblje prolazi slabošću, gubitkom apetita. U trećini slučajeva pojavljuju se groznica, artralgija, polimorfni osip. Moguće su dispeptične pojave i polineuropatije. Kolestaza je izuzetno rijetka..

    Indikacije u svrhu ispitivanja

    Priprema studije

    Uz ovu studiju, najam

    • 20.79. AT i AH za HIV 1/2 (probir, kval.)
    • 20.21. Hepatitis B, HBs Ag (kvalitetno)
    • 20,80. Zbir sifilisa. AT (IgG i IgM) (kvalitativno)
    • 20,118. Hepatitis A, anti-HAV zbroj. AT (računanje)
    • 3.9.1. Klinički test krvi s leukocitnom formulom i ESR-om (mikroskopijom krvnog mrlja kada su otkrivene patološke promjene) (venska krv)
    • 27,113. Biokemija 8 pokazatelja

    Rezultati istraživanja

    Čimbenici koji utječu na rezultate istraživanja

    Tumačenje rezultata

    • „Pronađeno“: u analiziranom uzorku biološkog materijala pronađen je fragment RNA specifičan za virus hepatitisa C, infekciju virusom hepatitisa C.
    • "Nije otkriveno": fragment RNA specifičan za virus hepatitisa C ili koncentraciju RNA patogena u uzorku ispod granice osjetljivosti ispitivanja nije nađen u analiziranom uzorku biološkog materijala.

    PCR za hepatitis C

    PCR (ili lančana reakcija polimeraze) laboratorijska je metoda za dijagnozu DNA i RNA patogena koju je uveo Carey Mullis (SAD). Samo jedna molekula pronađena u koži ili tjelesnoj tekućini dovoljna je za visoko osjetljivu PCR analizu kojom se identificira virus patogena.

    Vrste PCR-a

    Postoje tri vrste PCR analize krvi za virus kroničnog hepatitisa C - kvalitativna, kvantitativna i analiza koja određuju genotip virusa.

    Kvalitativna PCR analiza hepatitisa C provodi se za one bolesnike kojima je ELISA analizom otkrila antitijela na HVGS. Rezultat kvalitativne PCR analize označen je riječima "RNA otkrivena" ili "RNA nije otkrivena". Ispitni sustavi s osjetljivošću od najmanje 50 IU / ml mogu otkriti minimalnu količinu patogena u krvi. Pri nižoj koncentraciji virusa analiza može dati lažno negativan rezultat. Da bi se izbjegle pogreške, laboratoriji specijalizirane za PCR dijagnostiku moraju biti opremljene ispitnim sustavima visoke osjetljivosti. Na primjer, laboratorija Invitro koristi ispitne sustave s osjetljivošću od 15 IU / ml. Pacijenti i liječnici imaju pravo zatražiti test osjetljivosti od osoblja laboratorija.

    Za utvrđivanje koncentracije virusa u krvi (ili stupnja viremije) potrebna je kvantitativna PCR analiza hepatitisa C. Rezultati govore brojevima. Ako se u 1 ml krvi nađe 2 milijuna IU, tada je rezultat sljedeći - 2 × 10 * 6 IU / ml. Neki laboratoriji koriste drugačiji pokazatelj - broj primjeraka na 1 ml krvi (1 IU je 4 kopije RNA). Ispada da 2 × 10 * 6 IU / ml odgovara 8 × 10 * 6 kopija virusa RNA (8 milijuna primjeraka) u 1 ml krvi.

    Genotipiziranjem se određuje kojem od šest genotipova virus pripada. To je genotip patogena koji utječe na kliničku sliku, brzinu komplikacija i daljnju prognozu za pacijenta. Ispravno određivanje genotipa virusa omogućava odabir kombinacije lijekova i određivanje trajanja liječenja.

    Indikacije za analizu

    Da bi se potvrdila prisutnost HCV-a, propisana je PCR analiza koja će pomoći otkriti patogen i započeti liječenje. Indikacije za imenovanje:

    • Pacijent ima znakove upale jetre.
    • Pregled za preventivne studije.
    • Potrebno je pregledati ljude u kontaktu s pacijentima s hepatitisom.
    • Dijagnosticiran je hepatitis mješovitog podrijetla, a mora se utvrditi glavni uzročnik.
    • Utvrđuje se razina reproduktivne aktivnosti patogena u kroničnih bolesnika..
    • Pacijentu je dijagnosticirana ciroza.
    • Potrebno je procijeniti učinkovitost terapije.

    Priprema za PCR dijagnostiku hepatitisa

    Postupak se izvodi ujutro na prazan želudac, krv se uzima iz vene..

    Pacijent mora slijediti sljedeća pravila:

    • Ne jedite hranu 10 sati prije postupka. Dopuštena je samo čista voda..
    • Ne pušite 4 sata prije manipulacije i ne pijte alkohol dan prije analize.
    • Izbjegavajte fizički i psihološki stres prije postupka.
    • Ne uzimajte lijekove 2 dana prije uzorkovanja krvi. Ako je pacijent uzeo lijekove iz bilo kojeg razloga, o tome mora biti obaviješten laboratorijski pomoćnik (uporaba određenih lijekova uzrokuje pogrešno pozitivan rezultat).

    Dešifrovanje rezultata PCR studija

    Dešifriranje ELISA i PCR analize zadatak je hepatologa ili stručnjaka za infektivne bolesti. Potrebni su i rezultati biopsije, biokemijske analize krvi i ultrazvuka. Dešifrirati rezultate PCR analize može samo kvalificirani liječnik koji bi trebao propisati terapiju na njihovoj osnovi. Tablice za dekodiranje virusnog opterećenja za hepatitis C date su u nastavku.

    Kvalitativna analiza. Dešifriranje

    OtkrivenoPacijent je zaražen jer virus RNA pronađena u njegovom biološkom materijalu.
    Nije otkrivenPacijent nije zaražen ili je količina RNA virusa ispod granice osjetljivosti.

    Kvantitativna analiza. Dešifriranje

    Nije otkrivenOsoba je zdrava. RNA virusa nije pronađena u biomaterijalu ili je njegova koncentracija ispod granice osjetljivosti.
    Do 1,8 * 10 ^ 2 IU / mlKoncentracija virusa RNA je ispod raspona kvantifikacije. U ovom je slučaju potreban oprez pri tumačenju rezultata. Često su potrebna ponovljena istraživanja..
    Do 8 * 10 ^ 5 IU / mlNiska razina virusnog opterećenja kod hepatitisa C. U pravilu, smanjenje koncentracije virusa ukazuje na uspješno liječenje.
    Više od 8 * 10 ^ 5 IU / mlVisoko opterećenje virusa hepatitisa C.
    Više od 2,4 * 10 ^ 7 IU / mlBudući da je količina RNA virusa izvan gornje granice raspona kvantifikacije, nemoguće je odrediti razinu virusnog opterećenja. Trebate ponoviti test s razrjeđivanjem uzorka krvi.

    Otkrivena RNA specifičnog genotipaOtkriven je virus hepatitisa C koji pripada specifičnom genotipu i podtipu u biomaterijalu pacijenta. Rezultat je označen brojevima i latiničnim slovima: 1a, 2b itd. Postoji 7 genotipova i 67 podtipova. Od 7 genotipova, prva 3 nalaze se u Rusiji.
    Otkrivena RNA virusa hepatitisa CRNA atipičnog genotipa virusa za Rusiju pronađena je u biomaterijalu pacijenta, pa su potrebna dodatna ispitivanja.
    Nije otkrivenOsoba je zdrava ili je u krvi vrlo niska koncentracija RNA virusa.

    Ponekad je PCR analiza negativna, ali test ELISA pokazuje prisutnost antitijela na virus. To znači da se osoba koja je imala akutni hepatitis C uspjela oporaviti sama. Oko 20 slučajeva zaraze snažnom otpornošću tijela na infekciju završava spontanim izlječenjem.

    U nekim situacijama se rezultati visoko precizne PCR analize mogu iskriviti:

    1. Kršenja temperaturnog režima i drugi uvjeti za transport krvi u laboratorij.
    2. Kontaminacija uzorka krvi.
    3. Prisutnost tragova heparina i drugih antikoagulansa u krvi.
    4. Prisutnost inhibitora u biomaterijalima (lančana reakcija polimeraze usporava ili zaustavlja se).

    Prednosti PCR analize

    Prvo, ovo je metoda rane dijagnoze koja vam omogućuje identifikaciju genetskog materijala virusa. Analizom ELISA mogu se utvrditi samo tvari koje tijelo proizvodi kao odgovor na infekciju (imunoglobulini). Od trenutka infekcije hepatitisom C do početka imunološkog odgovora može proći nekoliko tjedana ili čak mjeseci, a tijekom ovog razdoblja ELISA nije učinkovita. PCR analiza već u prvom tjednu infekcije daje odgovor.

    Druga prednost PCR analize je mala vjerojatnost pogreške. U studiji se određuje odjeljak genetskog materijala koji je karakterističan samo za jednu vrstu patogena, što omogućava isključenje lažnog rezultata. ELISA analiza pokazuje prisutnost antitijela koja se oslobađaju protiv različitih virusa (unakrsna antitijela).

    Nedostaci PCR-a

    Bez obzira koliko je studija učinkovita, ima i svojih nedostataka:

    • Tijekom ispitivanja s PRC-om reproducira se genetski materijal patogena (uključujući nežive), što dovodi do izobličenja rezultata. Da bi se procijenila učinkovitost liječenja primjenom PCR analize, drugo istraživanje provodi se najmanje 2 mjeseca nakon prethodnog. Pacijentovo tijelo mora biti "očišćeno" od mrtvih virusa.
    • Ispitni sustavi određuju dio virusnog genoma koji teoretski može pripadati drugim virusima ili mikroorganizmima, pa postoji mogućnost lažno pozitivnog rezultata.
    • Brza mutacija virusa ponekad nadmašuje sposobnost testnih sustava da odrede genom patogena, pa postoji mogućnost lažnog negativnog odgovora.

    Proizvođači laboratorijskih ispitnih sustava redovito ih testiraju, otkrivajući kako sustavi reagiraju na unakrsne reakcije ili bilo koji genotip virusa..

    Cijena PCR analize za hepatitis C

    U državnim se institucijama analiza može učiniti besplatno, potrebna je samo uputnica hepatologa ili stručnjaka za zarazne bolesti.

    Plaćeno istraživanje dostupno je u svim većim gradovima Ruske Federacije. Na cijenu utječu vrsta istraživanja, oprema koja se koristi, vrijeme potrebno za analizu.

    U Moskvi i Sankt Peterburgu visokokvalitetna PCR analiza hepatitisa C košta od 600 do 900 rubalja, u regiji - od 300 do 800 rubalja.

    Kvantitativna PCR analiza hepatitisa C košta od 17.000 do 22.000 rubalja, za hepatitis B - od 1.200 do 10.000 rubalja.

    Da biste dobili pouzdane rezultate PCR analize za hepatitis C, trebate kontaktirati samo renomirane laboratorije. U ovom slučaju, pitanje troškova istraživanja bježi u pozadinu.