PCR analiza hepatitisa C i interpretacija rezultata

Hepatologist

Srodne specijalnosti: gastroenterolog, terapeut.

Adresa: Sankt Peterburg, ul. Akademika Lebedeva, 4/2.

Hepatitis C je upalna patologija u kojoj su pogođene stanice jetre. Bolest se razvija zbog prodora virusa hepatitisa C (HVC) u ljudsko tijelo..

Oblik bolesti može biti akutni ili kronični..

Najčešće su simptomi akutnog oblika patologije u većini bolesnika odsutni, ponekad bolest prati bol u trbuhu, smanjena radna sposobnost, povećani umor, oslabljen apetit, tamna nijansa urina, obezbojenje izmeta, žutost kože i sluznice, bol u zglobovima. Ti se simptomi obično javljaju 6-8 tjedana nakon infekcije, ali mogu se pojaviti šest mjeseci kasnije..

S razvojem takvih pojava potrebno je kontaktirati medicinsku ustanovu i proći sveobuhvatni pregled cijelog organizma. U sklopu liječničkog pregleda obavlja se krvni test na hepatitis C.

Danas se pomoću modernih dijagnostičkih tehnika ova patologija može otkriti u početnoj fazi razvoja, što značajno povećava izglede za potpuno izlječenje bolesti.

Sljedeće skupine ljudi moraju proći analizu na hepatitis C:

  • žene tijekom razdoblja rađanja djeteta;
  • osobe s znakovima hepatitisa;
  • zaposlenici medicinskih ustanova;
  • potencijalni davatelji organa i krvi;
  • ovisnici o drogama, HIV-zaraženi, ljudi koji vode užurban intimni život.

Popis potrebnih studija

Koje testove je potrebno učiniti s hepatitisom C? Za točnu dijagnozu bolesti, prepoznavanje njezinih uzroka i utvrđivanje stanja jetrenog parenhima, potrebna su sljedeća ispitivanja:

  • opća analiza urina i krvi;
  • biokemijski test krvi;
  • PCR analiza;
  • krvni test za otkrivanje antitijela na HVC;
  • krvni test na postojeća antitijela na vlastite stanice jetre;
  • biopsija jetre.

Dešifriranje krvnog testa za hepatitis C provodi specijalist. Svaku metodu istraživanja razmotrit ćemo detaljnije, a također ćemo ustanoviti koji je test na hepatitis C najtačniji..

Opća analiza

Kada obavljate opći test krvi na hepatitis C, možete procijeniti pacijentovo stanje. Promjene u krvnoj slici ne doživljavaju se kao specifični simptomi hepatitisa, međutim, s ovom bolešću, poremećaji poput:

  • smanjuje se koncentracija hemoglobina, trombocita i bijelih krvnih zrnaca;
  • povećava se sadržaj limfocita;
  • koagulacija krvi je oslabljena;
  • brzina sedimentacije eritrocita (ESR) raste.

Općenita analiza urina omogućava otkrivanje urobelina, žučnog pigmenta koji se pojavljuje u urinu kao rezultat oštećene funkcije jetre.

Biokemijska analiza

Biokemijski test krvi na hepatitis C može otkriti kršenja poput:

  • povećani sadržaj jetrenih enzima (alanin transaminaza - ALT i aspartat aminotransferaze - AST), koji u oštećeni hepatocit ulaze u krvotok. U normalnom stanju, ti pokazatelji kod muškaraca ne bi trebali biti veći od 37 IU / l, u žena - ne veći od 31 IU // l. Povišena koncentracija ALT i AST kod asimptomatskog hepatitisa C često je jedini simptom ove bolesti. Uz to, povećava se razina alkalne fosfataze glutamil transpeptidaze u sastavu krvi (normalno ne viša od 150 IU / l).
  • prekoračen je sadržaj bilirubina (i općeg i izravnog) u krvi. Ako razina žutog pigmenta u krvnom serumu prelazi 27-34 µmol / L, javlja se žutica (do 80 µmol / L u blagom obliku, 86-169 µmol / L u umjerenom obliku, iznad 170 µmol / L u teškom obliku).
  • Razina albumina je snižena, koncentracija gama globulina, naprotiv, povećana. Gama globulini sastoje se od imunoglobulina - antitijela koji štite tijelo od patogena.
  • povećana koncentracija triglicerida u krvi.

PCR studija

Pomoću PCR-a možete dijagnosticirati uzročnika bolesti. Izvođenje ove analize omogućuje otkrivanje virusa u krvi, čak i ako je njegova količina minimalna. PCR analiza hepatitisa C omogućava vam da utvrdite postojeću infekciju u krvi nakon 5 dana od trenutka infekcije, to jest mnogo prije nego što se antitijela pojave.

Ako je rezultat krvnog testa za hepatitis C PCR-om pozitivan, to ukazuje na prisutnost aktivne infekcije u tijelu. Pomoću ove metode možete provesti kvalitativno i kvantitativno istraživanje HVC RNA.

Tijekom kvalitativne analize PCR na hepatitis C moguće je otkriti postojeći virus u ljudskom tijelu.

Ovaj dijagnostički postupak provodi se ako se utvrdi anti-HVC u krvi..

Tumačenje testa za hepatitis C sadrži informaciju da je infekcija otkrivena ili nije otkrivena u tijelu. U normalnom stanju patološke tvari u krvi se ne otkriju.

Ako test na hepatitis C daje pozitivan rezultat, to pokazuje da se patogeni mikroorganizam kontinuirano dijeli i utječe na jetrene stanice.

Rezultati takve analize mogu biti nepouzdani, što je moguće u sljedećim slučajevima:

  • sa kontaminacijom upotrijebljenog biomaterijala;
  • u prisutnosti heparina u krvi;
  • u prisutnosti kemijskih ili proteinskih tvari (inhibitora) u ispitivanom biomaterijalu koji utječu na PCR elemente.

Kvantitativna analiza za hepatitis C daje podatke o količini virusa koji se nalazi u krvi, odnosno određuje virusno opterećenje. Pod tim pojmom podrazumijeva se količina HVC RNA prisutna u krvi (na primjer, u 1 ml). U dekodiranju kvantitativne analize za hepatitis C ta se vrijednost izražava u digitalnim iznosima, mjereno u IU / ml.

Prije terapijskih mjera dariva se krv za PCR s hepatitisom C. Nakon provedene analize nakon 1, 4, 12 i 24 tjedna. Studija u 12. tjednu indikativna je i provodi se kako bi se procijenila učinkovitost postojećih medicinskih postupaka.

Ako je analiza za hepatitis C tijekom trudnoće pozitivna i vrijednosti virusnog opterećenja premašene, rizik od prenošenja patogena s bolesne majke na dijete nekoliko se puta povećava. Također, s povećanim vrijednostima virusnog opterećenja, provođenje terapijskih mjera je teško.

Prema interpretaciji testova za hepatitis C, ako vrijednosti virusnog opterećenja prelaze 800 000 IU / ml, tada je to visoka. Ako su vrijednosti ispod 400 000 IU / ml, razina virusnog opterećenja smatra se niskom..

PCR analiza za hepatitis C smatra se najtačnijom i ima nekoliko prednosti u odnosu na druge mogućnosti istraživanja, naime:

  • izravna dijagnoza uzročnika bolesti. Prilikom izvođenja tradicionalnih istraživanja određuje se prisutnost proteinskih markera, koji su proizvodi vitalne aktivnosti patogenih tvari. To samo govori da je infekcija prisutna u krvi. Pri prolasku analize za hepatitis C PCR-om moguće je utvrditi vrstu patogena opasne patologije.
  • specifičnost tehnike. Tijekom ovog postupka određuje se jedinstvena DNA regija u biomaterijalu koja odgovara samo jednoj vrsti patogena. To umanjuje vjerojatnost neistinitih rezultata..
  • visoka osjetljivost. Prilikom provođenja PCR analize može se otkriti minimalna količina virusa. Ovo je važno ako se utvrde oportunističke tvari koje predstavljaju prijetnju samo ako se poveća njihova razina..
  • kada se ovom tehnikom koristi u jednom uzorku biomaterijala, može se otkriti više patogena odjednom.
  • možete otkriti skrivene infekcije. Pored toga, analiza vam omogućuje dijagnosticiranje patogena koji žive unutar stanica i imaju veliku antigenu varijabilnost.

Ako su rezultati ispitivanja pozitivni, tada se u biomaterijalima otkrivaju tragovi virusa, tada mreža u tijelu ima infekciju.

Negativna PCR analiza hepatitisa C znači da u biomaterijalima nema tragova infekcije.

Imunološka istraživanja

Ova metoda omogućuje vam određivanje protutijela na sve vrste virusa hepatitisa, kao i antitijela na stanice jetre vašeg vlastitog tijela, čiji razvoj olakšava razvoj autoimunog hepatitisa.

Rezultati dobiveni tijekom studije relevantni su za 3 mjeseca, a zatim biste trebali ponovo darivati ​​krv za hepatitis C.

Također je moguće izvesti ekspresno istraživanje pomoću posebnih test traka. Ova analiza omogućuje utvrđivanje protutijela na virus C u sastavu krvi i sline. Ovaj postupak se može provesti samostalno, kod kuće.

Biopsija jetre

Za provođenje takve analize uzima se element jetrenog parenhima i vrši se histološki pregled dobivenog biomaterijala. To vam omogućuje procjenu stanja tijela: prepoznati upalne, nekrotične žarišta, stadij fibroze itd..

Danas se koriste testovi koji zamjenjuju histološku analizu jetrenog parenhima.

Specifični biomarkeri iz otrova u krvi koriste se za procjenu stupnja oštećenja jetre i intenziteta upalnog procesa. Koristeći Fibrotest, možete procijeniti stupanj proliferacije vlaknastog tkiva.

Kada obavljate Actitest, možete dobiti informacije o intenzitetu patoloških procesa u jetrenom parenhimu. Uz pomoć Steatotesta moguće je dijagnosticirati masnu degeneraciju jetrenog tkiva i procijeniti stupanj ovog procesa. Fibromax se sastoji od svih gore navedenih testova i može uključivati ​​neka druga istraživanja..

Priprema studije

Koji se testovi rade na hepatitis C i kako se provodi ova ili ona vrsta ispitivanja, otkrili smo. Jednako je važno znati pripremiti se za analizu..

Da biste dobili pouzdane rezultate, preporučuje se pridržavati se sljedećih zahtjeva:

  • testovi za hepatitis C moraju se uzeti ujutro, na prazan želudac. Hranu treba konzumirati najmanje 8 sati prije ispitivanja..
  • Biomaterijal se može uzimati danju ili navečer. U ovom je slučaju važno da protekne najmanje 5-6 sati između posljednjeg obroka i analize.
  • Prije davanja krvi za hepatitis C trebali biste odbiti čaj, kavu, sok ili druga pića, dopuštena je samo voda.
  • 48 sati prije studije potrebno je isključiti upotrebu masne, pržene hrane i pića koja sadrže alkohol.
  • barem sat vremena prije analize, suzdržite se od pušenja.
  • ne obavljajte analizu odmah nakon ultrazvuka, instrumentalnog, rendgenskog pregleda, masaže ili fizioterapije.
  • dan prije studije, potrebno je isključiti uporabu lijekova i intenzivnu fizičku aktivnost. Emocionalni stres je također kontraindiciran..
  • 15 minuta prije ispitivanja preporučuje se provesti u mirnom stanju.

Uzorkovanje krvi

Gdje se testirati na hepatitis C? Biomaterijal se uzima za daljnja istraživanja u laboratoriju medicinske ustanove ili u pacijentovu domu.

Krv iz vene se uzima na sljedeći način:

  • uz pomoć posebnog štapa omotanog oko pacijentove podlaktice obustavlja se protok venske krvi. Zahvaljujući takvim manipulacijama, vene će se napuniti krvlju i bit će uočljivije, što će uvelike olakšati postupak uvođenja igle.
  • područje kože u koje će se igla umetnuti temeljito se tretira alkoholom ili tekućinom koja sadrži alkohol.
  • igla se pažljivo umetne u venu, a zatim se na nju pričvrsti cijev posebno dizajnirana za prikupljanje krvi.
  • odmah nakon umetanja igle u venu, kompresioni žičak uklanja se iz pacijentove ruke.
  • nakon prikupljanja volumena krvi potrebnog za analizu igla se nježno uklanja iz vene.
  • na mjesto ubrizgavanja mora se nanijeti sterilni pamuk ili gaza umočen u alkohol.
  • da se spriječi pojava hematoma, tampon treba pritisnuti s malo napora na područje umetanja igle, saviti ruku u lakatnom zglobu i držati u tom položaju nekoliko minuta. Takve akcije će također pomoći bržem zaustavljanju krvi..

Pod uvjetom da je tehnika unutarnje primjene dobra, ovaj je postupak apsolutno siguran i ne uzrokuje bol prilikom čitanja..

U rijetkim je slučajevima moguće oticanje vena nakon uzorkovanja krvi. Taj se fenomen naziva flebitis. Kompres (nije vruć) pomoći će riješiti problem, treba ga nanositi na natečenim dijelovima kože nekoliko puta dnevno.

Određeni problemi mogu se pojaviti i ako postoji poremećaj krvarenja. Uzimanje aspirina, varfarina i drugih sredstava za razrjeđivanje krvi može uzrokovati krvarenje. Zato je prije provođenja analize potrebno odbiti uzimati bilo kakve lijekove. Ako se liječenje ne može otkazati, obavijestite stručnjaka.

Datumi i cijene

Koliko se radi test na hepatitis C? Rezultati krvne pretrage na hepatitis mogu biti spremni za nekoliko sati i za nekoliko dana (obično ne više od 8 dana). Trajanje pripreme rezultata ovisi o vrsti virusa i odabranoj metodi analize. Brže je istraživanje koje je provela PCR. Rezultati će u ovom slučaju biti spremni za samo nekoliko sati..

Koliko košta test za hepatitis C? Ovisno o klinici i složenosti studije, cijena postupka može varirati od 400 do 11 000 rubalja.

Treba biti svjestan da može proći nekoliko tjedana da nastane dovoljan volumen anti-HVC antitijela. Stoga, u ranoj fazi razvoja patologije, rezultat studije može biti lažno negativan.

Osim toga, dobivanje lažnih podataka moguće je uz nekvalitetnu analizu i kršenje uvjeta transporta dobivenog biomaterijala (uzorci se moraju dostaviti u laboratorij najviše 2 sata nakon uzorkovanja krvi).

Ako je rezultat studije pozitivan, morate odmah kontaktirati liječnika zaraznih bolesti. Specijalist će provesti dodatni pregled i propisati odgovarajući tretman..

PCR analiza za otkrivanje hepatitisa C

Hepatitis C je najopasnija kategorija bolesti, karakteriziran akutnom simptomatskom slikom i posebnom ozbiljnošću tijeka. Glavni uzročnik ove infekcije je virus HCV, koji se sastoji od više molekula ribonukleinske kiseline (RNA). Kad uđe u tijelo, vrlo brzo mutira, prelazeći iz akutnog u kronični stadij, zbog čega ga treba dijagnosticirati u ranim fazama razvoja. I analiza PCR na hepatitis C pomoći će u tome.

Opće činjenice o hepatitisu C

Virusni hepatitis kategorije C smatra se najopasnijim, jer ima tendenciju prema čestoj varijabilnosti tijekom razvoja. Kao rezultat ove pojave, ljudski imunološki sustav ne može proizvesti prava antitijela za prirodnu borbu protiv infekcije, koja uzrokuje komplikacije poput ciroze, raka jetre i žutice.

U inkubacijskom razdoblju virusna bolest se ni na koji način ne očituje, zbog čega pacijent uopće ne zna za njegovo postojanje u svom tijelu. Ali nakon nekog vremena, hepatitis se osjeti slijedećim simptomima:

  • Pojava kroničnog umora;
  • Periodična bol u glavi, zglobovima i desnom hipohondriju;
  • Iznenadni bolovi mučnine i povraćanja;
  • Brzo mršavljenje;
  • Povišena temperatura (do 37 stupnjeva);
  • Karakteristično požutelje kože.

U ovoj fazi patologija traje ne više od 1-2 tjedna, nakon čega stječe kronični oblik i terorizira pacijenta tijekom ostatka života, nastajući u obliku ponovljenih relapsa. Da biste izbjegli takav neugodan ishod, za hepatitis C možete koristiti samo PCR test krvi, koji bi se trebao uzeti odmah nakon kontakta s vjerojatnim nositeljem infekcije..

Indikacije za dijagnozu

Ispitivanje lančane reakcije polimeraze propisano je ne svim pacijentima. Glavne indikacije za njegovu provedbu su:

  • Potreba za prepoznavanjem uzročnika virusne patologije;
  • Identifikacija usporedbom pacijentove krvi s dostupnim genetskim materijalima;
  • Ispitivanje tkiva stvoreno biopsijom;
  • Studija malignih tumora i leukemije;
  • Otkrivanje genetske bolesti.

Pažnja! PCR analiza hepatitisa C vrlo je učinkovita metoda za otkrivanje patologije u ranoj fazi njenog razvoja. Pravovremena dijagnoza bolesti povećava šanse za uspješan oporavak.

Vrste PCR analize

PCR dijagnoza hepatitisa C podrazumijeva biološki test krvi za otkrivanje elemenata virusa RNA u njemu. Prema njegovim rezultatima, moguće je utvrditi ne samo prisutnost ili odsutnost infekcije u tijelu, već i stupanj njegovog razvoja (trenutni genotip), kao i neke karakteristične karakteristike tijeka. U ovom slučaju, PCR indikator samo je jedan od ključnih elemenata dijagnoze, a bez dodatnih testova za potvrdu dijagnoze hepatitisa C neće uspjeti.

kvaliteta

Kvalitativno istraživanje lančane reakcije polimeraze na prisutnost uzročnika hepatitisa C standardni je pokazatelj koji može odgovoriti na samo jedno pitanje pacijenta: postoji li virus u njegovom tijelu ili ne. Štoviše, negativan rezultat ovog testa nije stopostotna potvrda nepostojanja infekcije. Doista, s niskom koncentracijom patogena u ljudskoj krvi, razina HCV bakterija bit će niža od minimalne i PCR istraživanje jednostavno ga neće otkriti.

kvantitativan

Kvantitativna analiza lančane reakcije polimeraze je opsežniji pokazatelj koji pokazuje trenutni virusni teret na pacijentovom tijelu. Prema njegovim rezultatima, liječnik može reći koliko je štetnih RNA prisutno u krvi osobe u vrijeme postavljanja dijagnoze. Ali ova vrsta PCR-a propisana je samo u slučajevima kada je prethodna studija dala pozitivan rezultat..

Zahvaljujući kvantitativnom testu, stručnjaci određuju tri glavna pokazatelja koji karakteriziraju virusnu patologiju:

  • Razina infektivnosti (visoka koncentracija RNA stanica ukazuje na sposobnost bolesti da se širi s nositelja na druge osobe);
  • Učinkovitost propisane terapije;
  • Približno trajanje liječenja i očekivane prognoze (kronični hepatitis C ne napušta tijelo, a uz stalnu upotrebu lijekova pacijent može izbjeći samo ponovljene relapse).

Minimalni pokazatelj kvantitativne PCR analize jednak je 600 tisuća IU / ml. Viša patologija od 650-700 tisuća IU / ml nalazi se u akutnom stadiju. Pa, maksimalna dopuštena razina RNA stanica u pacijentovoj krvi ne može prijeći granicu od 800 000 IU / ml.

genotipizacija

Analiza genotipizacije nakon otkrivanja RNA virusa hepatitisa C provodi se među dodatnim istraživanjima, a rezultatima se može utvrditi samo trenutni genotip patologije. Ali za imenovanje terapije, ovaj pokazatelj igra ključnu ulogu, budući da svaki stadij infekcije ima svoj tijek karaktera i simptomatsku sliku..

Uz to, prema rezultatima genotipizacije, specijalist može utvrditi trenutno stanje pacijentove jetre. Zaista, što je niži genotip osobe promatran, veća je vjerojatnost da je njegov organ pretrpio neke strukturne promjene, povećavajući se u veličini ili poprimivši neprirodan oblik.

Glavne prednosti studije

U usporedbi s tradicionalnim krvnim pretragama, analiza PCR-a na hepatitis C ima nekoliko prednosti. Naime:

  • Sposobnost utvrđivanja prirode patogena;
  • Visoka osjetljivost na virusno opterećenje (za razliku od OAC, ELISA i drugih sličnih testova, PCR analiza vrlo rijetko pokazuje lažno pozitivne rezultate);
  • Širok spektar biomaterijala koji se proučavaju (da biste otkrili virus, možete proučavati ne samo pacijentovu krv, već i dijelove njegovog epitela ili dijelove s sluznice);
  • Brza dešifriranje rezultata;
  • Sposobnost otkrivanja bolesti u ranoj fazi razvoja;
  • Obrada dobivenog biomaterijala kako bi se smanjila razina njegove infektivnosti tijekom ispitivanja;
  • Potpuna automatizacija procesa.

Važno je znati! Da bi ova analiza bila ispravna, laboratorijsko osoblje trebalo bi temeljito provjeriti opremu i elemente koji se proučavaju. A to se može smatrati ozbiljnim nedostatkom PCR testa..

Priprema za postupak darivanja krvi

Prije testa za otkrivanje elemenata ribonukleinske kiseline u krvi, pacijent mora proći malo pripreme, koja se odvija u nekoliko faza. Prva faza uključuje sljedeća ograničenja:

  • Odbijanje alkoholnih pića (ne manje od 3 dana prije isporuke biomaterijala);
  • Isključivanje bilo kakve tjelesne aktivnosti (2-3 dana prije PCR analize);
  • Zabrana pušenja i hrane (izrečena predmetu nekoliko sati prije postupka).

Ako je RNA stanica hepatitisa C prenesena osobi od vjerojatnog nosača seksualnim kontaktom, tada će se dodati i sljedeće zabrane:

  • Prekid svih vrsta snošaja, kroz oralne, analne i vaginalne otvore (2-3 dana prije planirane analize);
  • Apstinencija od odlaska malih potreba (neposredno prije početka postupka);
  • Isključivanje svih vrsta deterdženata tijekom kupanja (dan prije ispitivanja).

Istodobno, strogo je zabranjeno uzimati PCR za hepatitis C tijekom menstrualnog ciklusa, jer će vjerojatnost pogreške u dešifriranju rezultata biti gotovo sto posto.

Dešifriranje rezultata analize

Ovisno o vrsti PCR analize za hepatitis C, rezultat može biti ne samo negativan ili pozitivan, već i numerički dešifriran. Za kvantitativni test određivanje dobivenih pokazatelja će biti kako slijedi:

Opterećenje virusa
(IU / ml)
Što to znači
NeNorma za zdravu osobu, što ukazuje na odsutnost infekcije u njegovom tijelu. Ponekad se ta vrijednost može primijetiti i s niskom koncentracijom RNA u krvi (prisutna su antitijela na hepatitis C, a PCR je negativan). Ali taj se fenomen rijetko pojavljuje..
Ne više od 1,8xOpterećenje na tijelu je minimalno, što jasno ukazuje na prisutnost patologije u razdoblju inkubacije.
Manje od 8xVirus se tek počinje razvijati i traži fazu pogoršanja. U ovoj fazi ima smisla u cjelovitom liječenju bolesti.
Više od 8xBolest brzo napreduje, uništavajući pacijentovu jetru. Manifestira se prva simptomatologija. Šanse za oporavak vrlo su malene.
Više od 2,4xBolest predugo parazitira tijelo, a njegov se karakter postupno mijenja iz akutnog u kronični. Tijek terapije s takvim virusnim opterećenjem bit će što duži i nema šanse za potpuno oporavak.

Rezultate genotipizacije možete dešifrirati prema sljedećoj tablici koja je dolje navedena:

IndeksOznaka
RNA 1B, 2B ili 3BPronađen je hepatitis kategorije C s genotipom karakterističnim za teritorij Ruske Federacije u ljudskoj krvi.
RNA 4, 5, 6 ili 7Virusna patologija je prirode koja nije karakteristična za Rusiju i zemlje ZND. Ovim rezultatom testa pacijentu se šalje na niz dodatnih analiza radi utvrđivanja specifičnosti genotipa.
NeKoličina ribonukleinske kiseline je premala ili je takav element potpuno izostao u ispitivanom biomaterijalu.

Kvalitativna analiza PCR na hepatitis C može utvrditi je li virus otkrio RNA u pacijentovoj krvi ili ne. Preostala dva podatka o bolesti liječniku daju dva prethodna testa.

Lažni pozitivni i lažno negativni rezultati

Unatoč činjenici da se istraživanje lančane reakcije polimeraze smatra prilično točnom metodom za utvrđivanje virusnih patologija, neke se pogreške u njezinim rezultatima ipak mogu pojaviti.

I najčešće ih izazivaju sljedeće okolnosti:

  • Miješanje biomaterijala u laboratoriju (ako plazma uđe u struganje iz sluznice, urina ili drugih tekućina, rezultat PCR testa bit će lažno pozitivan);
  • Nepridržavanje pravila prijevoza i skladištenja proučenog materijala (u slučaju nepravilnog rukovanja, biološke tekućine gube sadržaj informacija zbog čega će analiza pokazati lažno negativan rezultat);
  • Nedostatak sterilnosti u laboratorijskoj sobi (ova je situacija potpuno slična prethodnoj okolnosti, što izaziva pogreške u dekodiranju PCR analize);
  • Zanemarivanje nepodobnosti reagensa (često su uzrok lažnog rezultata ispitivanja lančane reakcije polimeraze laboratorijski materijali kojima je istekao rok trajanja).

Istodobno se može dobiti lažno dešifriranje čak i ako se ne poštuju gornja pravila pripreme za davanje krvi. Ali u ovom slučaju morat ćete ponoviti postupak o svom trošku.

Učestalost PCR analize

Ograničenja PCR testa u modernoj medicini nisu data. No preporučeni broj studija za svaku kategoriju pacijenata bit će malo drugačiji. Naime:

  • Zdrav pacijent se ispituje jednom u 1-2 godine;
  • Kod osobe koja je podvrgnuta terapiji hepatitisom C, biomaterijal se provjerava dva puta: prije liječenja i na sredini tečaja;
  • Trudnice se mogu testirati 1-2 puta mjesečno tijekom cijelog gestacijskog razdoblja;
  • Za novorođenčad postupak se ponavlja 1-2 puta godišnje.

Za razliku od ultrazvučnog skeniranja, ova se mogućnost otkrivanja virusne patologije smatra apsolutno sigurnom, pa se može koristiti u bilo kojoj dobi.

Jedini nedostatak ovog postupka je njegova visoka cijena. Pa, što se tiče učinkovitosti, PCR test je najinformativnija analiza, koja se može koristiti za utvrđivanje ne samo prisutnosti infekcije u tijelu, već i trenutne faze njegova razvoja. A to je ključni faktor u propisivanju prave terapije..

PCR analiza za hepatitis C

Hepatitis C je ozbiljna bolest koja uništava jetru. Može dovesti do ciroze jetre. Između početka bolesti i trenutka kada se počnu stvarati antitijela može proći i do šest mjeseci, tako da je nemoguće dijagnosticirati bolest primjenom enzimski povezanog imunosorbenta. Pravodobna analiza bolesti i početak liječenja pomoći će analizi PCR na hepatitis C.

Indikacije za studiju

Kad trebate proći analizu:

  • ako je imunološki test enzima dao pozitivan rezultat;
  • pacijent ima simptome ciroze ili oštećenja jetre: mijenja se u veličini, slezina postaje veća, proširene vene su vidljive u trbuhu, koža postaje žuta, bolovi se primjećuju u desnoj strani trbuha;
  • povećava se aktivnost ALT i AST u krvnom testu;
  • prije početka liječenja, kako bi se utvrdila količina virusa u krvi zaražene osobe;
  • vidjeti koliko je terapija bila učinkovita. Nakon tretmana - za praćenje zdravlja i izbjegavanje recidiva;
  • ako je dijagnosticiran hepatitis B, da se isključi miješano oštećenje jetre;
  • nakon odnosa s osobom zaraženom hepatitisom.

Ciljevi ankete

Svrha PCR (ili lančane reakcije polimeraze) je ispitivanje sastava krvi i otkrivanje flavivirusa (hepatitis C). Značajna prednost ove analize je u tome što prepoznaje virus u fazi kada još nije započeo proces nepovratnih reakcija. PCR vam omogućuje da vidite koliko loše tijelo utječe, pokazuje kvalitativne karakteristike i određuje genotip virusa. Sve to vam omogućuje propisivanje najprikladnijeg liječenja za svaki određeni slučaj..

Raznolikosti analiza

PCR za otkrivanje hepatitisa C uključuje nekoliko studija:

  • kvalitativna analiza;
  • kvantitativna analiza;
  • genotipizacija.

Kvalitativna analiza

PCR se također naziva kvalitativnom analizom. Ako pokazuje negativan rezultat, tada je nemoguće prepoznati virus u tijelu, jer je njegov sadržaj manji nego što oprema može uhvatiti. U takvoj situaciji potrebno je utvrditi koliko je reagens osjetljiv kako bi se prilagodilo daljnje rješenje..

Analiza može pokazati pozitivan rezultat otprilike pet dana nakon što se osoba zarazila.

Kvantitativna analiza

Ova vrsta analize pokazuje razinu virusnog opterećenja, tj. Koncentracije flavivirusa u tijelu - koliko fragmenata virusa ima u 1 kubnom cm pacijentove krvi.

Ova vrsta PCR analize pacijentu je propisana prije početka antivirusne terapije, ili nakon tri mjeseca liječenja, kako bi se vidjelo koliko je učinkovit propisani tečaj..

Ova vrsta analize pokazuje:

  • koliko je velika opasnost od zaraze drugom osobom, ta je vjerojatnost izravno proporcionalna naznakama virusnog opterećenja;
  • koji je tretman u ovom slučaju prikladan i koliko će biti plodan;
  • trajanje liječenja - što je veća koncentracija virusa, to će terapija biti dulja.

Pacijent treba znati da ozbiljnost bolesti ne može ovisiti o razini virusnog opterećenja. Ponekad, čak i s velikom koncentracijom virusa u pacijentovoj krvi, jetra je samo malo oštećena. Međutim, ako trudnica ima visoku razinu virusnog opterećenja, vjerovatno je da će bolest prenijeti na svoje dijete.

Vjeruje se da je niža norma koncentracije virusa RNA do 600.000 IU / ml, prosječna od 600.000 do 700.000, visoka od 800.000 i viša.

genotipizacija

Zbog činjenice da je ovaj virus osjetljiv na velike mutacije, vrlo je važno utvrditi koji je genotip u krvi osobe tijekom ispitivanja. Ukupno postoji 11 genotipova hepatitisa C i mnoge su njihove podvrste. Ali u Rusiji su uobičajene samo tri: 1, 2 i 3.

Genotipiziranjem se može utvrditi otpornost virusa. O tome ovisi metoda liječenja..

Svi genotipovi hepatitisa C različito reagiraju na liječenje. 1 genotip se liječi najmanje godinu dana, a šansa za oporavak je oko 60%. Genotipovi 2 i 3 liječe se šest mjeseci, a vjerojatnost da se riješe bolesti je oko 85%.

Pored toga, genotipiziranje omogućava vidjeti u kakvom je stanju pacijentova jetra. Na primjer, nakupljanje masti u jetri ukazuje da pacijent pati od 3 genotipa virusa.

Krvni test u ovoj fazi pokazuje brojku koja karakterizira genotip. Povremeno nije moguće utvrditi genotip, a odgovori iz laboratorija ukazuju na „nije kucano“. To znači da osoba pati od genotipa koji nije čest na ovom zemljopisnom području. Da biste ga otkrili, morat ćete ponovo proći analizu, ali s dijagnostičkim sustavom koji to može prepoznati.

Postupak dešifriranja

U PCR analizama za hepatitis C dobivene iz laboratorija obično se naznače određeni podaci, a možete ih i sami dešifrirati:

  • otkriveno / nije otkriveno (kvalitativna analiza);
  • broj virusa (kvantitativna analiza);
  • genotip broj;
  • naziv testa.

Vjeruje se da se najviše pozornosti treba obratiti na drugu točku, jer na temelju tih pokazatelja možete napraviti prognozu, odrediti trajanje liječenja i njegovu vrstu.

Unatoč jasnoći analize, ne možete samostalno dijagnosticirati i samo-liječiti, rezultati analize moraju biti prikazani dežurnom liječniku.

Kako se pripremiti za analizu

Da biste dobili pouzdan rezultat, važno je poštivati ​​brojna pravila:

  1. Vrijedno je uzeti testove ujutro na prazan stomak (pokušajte jesti posljednji put najmanje 8 sati prije postupka).
  2. Prije darivanja krvi ne pijte ništa osim vode.
  3. Dva dana za uklanjanje masne i pržene hrane, kao i alkohola.
  4. Barem sat vremena bolje je odustati od cigareta.
  5. Ne preporučuje se uzimanje testova nakon masaže, ultrazvuka ili rendgenskih zraka.
  6. Dan prije pregleda pacijent bi trebao napustiti lijekove, fizičku aktivnost i emocionalni stres.
  7. Pola sata prije pregleda trebao bi biti miran i opušten..

Na brzinu PCR ispitivanja utječe od vrste virusa od kojeg pacijent pati i kojom se metodom krvi vrši test. Ovisno o složenosti, pacijent može dobiti rezultate ispitivanja za nekoliko sati ili nekoliko dana. Ali obično to ne traje više od 7 dana.

Na cijenu PCR testa utječe status klinike, kamo će pacijent ići i koliko će analiza biti teška. Cijena varira od 400 rubalja do 11 tisuća.

Važno je da pacijent zna da postoje takve stvari kao negativni lažni testovi. To se može dogoditi ako je krv za analizu napravljena pogrešno, kršeći pravila, ili je prevezena na neodgovarajući način (na primjer, u laboratorij je stigla više od dva sata nakon uzimanja). U takvoj situaciji pacijent riskira steći lažni dojam o svom zdravstvenom stanju i izgubiti dragocjeno vrijeme.

Stoga je izuzetno važno odabrati najprikladniju kliniku koja brine o svom ugledu i ne može priuštiti zanemarivanje pacijenata. Prije donošenja odluke, vrijedno je pročitati recenzije o ustanovi i njenom osoblju. Izbor je bolje zaustaviti na prestižnoj i dobro poznatoj klinici - vjerojatnost pogreške u ovom slučaju bit će mala.

Virus hepatitisa C, definicija kvaliteti RNA. (HCV-RNA, kvalitativno) u krvnom serumu

Određivanje RNA virusa hepatitisa C (HCV) u krvnom serumu polimeraznom lančanom reakcijom (PCR) s detekcijom u stvarnom vremenu.

Identificirani fragment je specifično mjesto RNA virusa hepatitisa C. Identificirani genotipovi: 1a, 1b, 2a, 2b, 2c, 2i, 3, 4, 5a, 6, bez obzira na podtip. Specifičnost određivanja je 100%. Osjetljivost određivanja - 60 IU / ml.

  • Klinički znakovi hepatitisa.
  • Preventivne probirne studije (RNA hepatitisa C virus je najraniji biljeg akutne infekcije).
  • Kontaktirajte anketama.
  • Dijagnoza hepatitisa miješane etiologije - identifikacija vodećeg virusa.
  • Identifikacija faze aktivne replikacije virusa u kroničnom stanju.
  • Praćenje učinkovitosti terapije.
  • Ciroza jetre.

Tumačenje rezultata istraživanja sadrži podatke za liječnika i nije dijagnoza. Podaci u ovom odjeljku ne mogu se koristiti za samo-dijagnosticiranje i samo-lijek. Liječnik postavlja točnu dijagnozu koristeći i rezultate ovog pregleda i potrebne podatke iz drugih izvora: anamnezu, rezultate drugih pregleda itd..

Virus hepatitisa C, plazma RNA (HCV, PCR), broj.

RNA virusa hepatitisa C, PCR, krv

Informacije o studiji

Studija vam omogućuje utvrđivanje količine RNA virusa hepatitisa C u krvnoj plazmi. Koristi se za dijagnosticiranje hepatitisa C i odabir terapije.

Uzročnik bolesti je virus hepatitisa C (HCV). Ovo je virus koji sadrži RNA koji pripada obitelji Flaviviridae. Ima hepatotropiju i uništava uglavnom stanice jetre, dok se također može razmnožavati u nekim vrstama bijelih krvnih stanica, oštećujući ih. Sposoban izazvati limfoproliferativne bolesti B-stanica, Sjogrenovu bolest i krioglobulinemiju.
Načini prijenosa:

  • parenteralno (kroz krv);
  • seksualna;
  • od majke do djeteta tijekom porođaja.
Bolest je najčešće asimptomatska, prelazi u kronični stadij. Za 15% bolesnika karakteristične su akutne manifestacije: gubitak apetita, bolovi u tijelu, mučnina, brzo mršavljenje.

Indikacije u svrhu ispitivanja

  • Dijagnoza virusnog hepatitisa.
  • Kontakt ispitivanje.
  • Praćenje učinkovitosti liječenja.
  • Dijagnoza recidiva hepatitisa C u kroničnom.
  • Ciroza jetre.
  • Krvni test darivatelja.
  • Ispitivanje djece rođene zaražene majke.
  • Predviđanje tijeka virusnog hepatitisa C.
Kontraindikacije i ograničenja

Ne postoje apsolutne kontraindikacije.

Priprema studije

  • Preporučuje se analiza na prazan želudac (8-14 sati nakon posljednjeg obroka).
  • Dan prije uzimanja biomaterijala, morate se odreći alkohola, uzimanja lijekova, intenzivnog fizičkog napora, masne hrane.
  • Sat vremena prije studije preporučuje se isključiti pušenje, piti kavu i jak čaj, gazirana pića.
  • Ne preporučuje se uzimanje analiza nakon fizioterapije, masaže, rendgenskih snimaka ili ultrazvuka.
Način istraživanja

Lančana reakcija polimeraze u stvarnom vremenu.

Format za predstavljanje rezultata, jedinica mjere (analizator)

Kvantitativna analiza, IU / ml (međunarodna jedinica po mililitru).

PCR za hepatitis C

PCR (ili lančana reakcija polimeraze) laboratorijska je metoda za dijagnozu DNA i RNA patogena koju je uveo Carey Mullis (SAD). Samo jedna molekula pronađena u koži ili tjelesnoj tekućini dovoljna je za visoko osjetljivu PCR analizu kojom se identificira virus patogena.

Vrste PCR-a

Postoje tri vrste PCR analize krvi za virus kroničnog hepatitisa C - kvalitativna, kvantitativna i analiza koja određuju genotip virusa.

Kvalitativna PCR analiza hepatitisa C provodi se za one bolesnike kojima je ELISA analizom otkrila antitijela na HVGS. Rezultat kvalitativne PCR analize označen je riječima "RNA otkrivena" ili "RNA nije otkrivena". Ispitni sustavi s osjetljivošću od najmanje 50 IU / ml mogu otkriti minimalnu količinu patogena u krvi. Pri nižoj koncentraciji virusa analiza može dati lažno negativan rezultat. Da bi se izbjegle pogreške, laboratoriji specijalizirane za PCR dijagnostiku moraju biti opremljene ispitnim sustavima visoke osjetljivosti. Na primjer, laboratorija Invitro koristi ispitne sustave s osjetljivošću od 15 IU / ml. Pacijenti i liječnici imaju pravo zatražiti test osjetljivosti od osoblja laboratorija.

Za utvrđivanje koncentracije virusa u krvi (ili stupnja viremije) potrebna je kvantitativna PCR analiza hepatitisa C. Rezultati govore brojevima. Ako se u 1 ml krvi nađe 2 milijuna IU, tada je rezultat sljedeći - 2 × 10 * 6 IU / ml. Neki laboratoriji koriste drugačiji pokazatelj - broj primjeraka na 1 ml krvi (1 IU je 4 kopije RNA). Ispada da 2 × 10 * 6 IU / ml odgovara 8 × 10 * 6 kopija virusa RNA (8 milijuna primjeraka) u 1 ml krvi.

Genotipiziranjem se određuje kojem od šest genotipova virus pripada. To je genotip patogena koji utječe na kliničku sliku, brzinu komplikacija i daljnju prognozu za pacijenta. Ispravno određivanje genotipa virusa omogućava odabir kombinacije lijekova i određivanje trajanja liječenja.

Indikacije za analizu

Da bi se potvrdila prisutnost HCV-a, propisana je PCR analiza koja će pomoći otkriti patogen i započeti liječenje. Indikacije za imenovanje:

  • Pacijent ima znakove upale jetre.
  • Pregled za preventivne studije.
  • Potrebno je pregledati ljude u kontaktu s pacijentima s hepatitisom.
  • Dijagnosticiran je hepatitis mješovitog podrijetla, a mora se utvrditi glavni uzročnik.
  • Utvrđuje se razina reproduktivne aktivnosti patogena u kroničnih bolesnika..
  • Pacijentu je dijagnosticirana ciroza.
  • Potrebno je procijeniti učinkovitost terapije.

Priprema za PCR dijagnostiku hepatitisa

Postupak se izvodi ujutro na prazan želudac, krv se uzima iz vene..

Pacijent mora slijediti sljedeća pravila:

  • Ne jedite hranu 10 sati prije postupka. Dopuštena je samo čista voda..
  • Ne pušite 4 sata prije manipulacije i ne pijte alkohol dan prije analize.
  • Izbjegavajte fizički i psihološki stres prije postupka.
  • Ne uzimajte lijekove 2 dana prije uzorkovanja krvi. Ako je pacijent uzeo lijekove iz bilo kojeg razloga, o tome mora biti obaviješten laboratorijski pomoćnik (uporaba određenih lijekova uzrokuje pogrešno pozitivan rezultat).

Dešifrovanje rezultata PCR studija

Dešifriranje ELISA i PCR analize zadatak je hepatologa ili stručnjaka za infektivne bolesti. Potrebni su i rezultati biopsije, biokemijske analize krvi i ultrazvuka. Dešifrirati rezultate PCR analize može samo kvalificirani liječnik koji bi trebao propisati terapiju na njihovoj osnovi. Tablice za dekodiranje virusnog opterećenja za hepatitis C date su u nastavku.

Kvalitativna analiza. Dešifriranje

OtkrivenoPacijent je zaražen jer virus RNA pronađena u njegovom biološkom materijalu.
Nije otkrivenPacijent nije zaražen ili je količina RNA virusa ispod granice osjetljivosti.

Kvantitativna analiza. Dešifriranje

Nije otkrivenOsoba je zdrava. RNA virusa nije pronađena u biomaterijalu ili je njegova koncentracija ispod granice osjetljivosti.
Do 1,8 * 10 ^ 2 IU / mlKoncentracija virusa RNA je ispod raspona kvantifikacije. U ovom je slučaju potreban oprez pri tumačenju rezultata. Često su potrebna ponovljena istraživanja..
Do 8 * 10 ^ 5 IU / mlNiska razina virusnog opterećenja kod hepatitisa C. U pravilu, smanjenje koncentracije virusa ukazuje na uspješno liječenje.
Više od 8 * 10 ^ 5 IU / mlVisoko opterećenje virusa hepatitisa C.
Više od 2,4 * 10 ^ 7 IU / mlBudući da je količina RNA virusa izvan gornje granice raspona kvantifikacije, nemoguće je odrediti razinu virusnog opterećenja. Trebate ponoviti test s razrjeđivanjem uzorka krvi.

Otkrivena RNA specifičnog genotipaOtkriven je virus hepatitisa C koji pripada specifičnom genotipu i podtipu u biomaterijalu pacijenta. Rezultat je označen brojevima i latiničnim slovima: 1a, 2b itd. Postoji 7 genotipova i 67 podtipova. Od 7 genotipova, prva 3 nalaze se u Rusiji.
Otkrivena RNA virusa hepatitisa CRNA atipičnog genotipa virusa za Rusiju pronađena je u biomaterijalu pacijenta, pa su potrebna dodatna ispitivanja.
Nije otkrivenOsoba je zdrava ili je u krvi vrlo niska koncentracija RNA virusa.

Ponekad je PCR analiza negativna, ali test ELISA pokazuje prisutnost antitijela na virus. To znači da se osoba koja je imala akutni hepatitis C uspjela oporaviti sama. Oko 20 slučajeva zaraze snažnom otpornošću tijela na infekciju završava spontanim izlječenjem.

U nekim situacijama se rezultati visoko precizne PCR analize mogu iskriviti:

  1. Kršenja temperaturnog režima i drugi uvjeti za transport krvi u laboratorij.
  2. Kontaminacija uzorka krvi.
  3. Prisutnost tragova heparina i drugih antikoagulansa u krvi.
  4. Prisutnost inhibitora u biomaterijalima (lančana reakcija polimeraze usporava ili zaustavlja se).

Prednosti PCR analize

Prvo, ovo je metoda rane dijagnoze koja vam omogućuje identifikaciju genetskog materijala virusa. Analizom ELISA mogu se utvrditi samo tvari koje tijelo proizvodi kao odgovor na infekciju (imunoglobulini). Od trenutka infekcije hepatitisom C do početka imunološkog odgovora može proći nekoliko tjedana ili čak mjeseci, a tijekom ovog razdoblja ELISA nije učinkovita. PCR analiza već u prvom tjednu infekcije daje odgovor.

Druga prednost PCR analize je mala vjerojatnost pogreške. U studiji se određuje odjeljak genetskog materijala koji je karakterističan samo za jednu vrstu patogena, što omogućava isključenje lažnog rezultata. ELISA analiza pokazuje prisutnost antitijela koja se oslobađaju protiv različitih virusa (unakrsna antitijela).

Nedostaci PCR-a

Bez obzira koliko je studija učinkovita, ima i svojih nedostataka:

  • Tijekom ispitivanja s PRC-om reproducira se genetski materijal patogena (uključujući nežive), što dovodi do izobličenja rezultata. Da bi se procijenila učinkovitost liječenja primjenom PCR analize, drugo istraživanje provodi se najmanje 2 mjeseca nakon prethodnog. Pacijentovo tijelo mora biti "očišćeno" od mrtvih virusa.
  • Ispitni sustavi određuju dio virusnog genoma koji teoretski može pripadati drugim virusima ili mikroorganizmima, pa postoji mogućnost lažno pozitivnog rezultata.
  • Brza mutacija virusa ponekad nadmašuje sposobnost testnih sustava da odrede genom patogena, pa postoji mogućnost lažnog negativnog odgovora.

Proizvođači laboratorijskih ispitnih sustava redovito ih testiraju, otkrivajući kako sustavi reagiraju na unakrsne reakcije ili bilo koji genotip virusa..

Cijena PCR analize za hepatitis C

U državnim se institucijama analiza može učiniti besplatno, potrebna je samo uputnica hepatologa ili stručnjaka za zarazne bolesti.

Plaćeno istraživanje dostupno je u svim većim gradovima Ruske Federacije. Na cijenu utječu vrsta istraživanja, oprema koja se koristi, vrijeme potrebno za analizu.

U Moskvi i Sankt Peterburgu visokokvalitetna PCR analiza hepatitisa C košta od 600 do 900 rubalja, u regiji - od 300 do 800 rubalja.

Kvantitativna PCR analiza hepatitisa C košta od 17.000 do 22.000 rubalja, za hepatitis B - od 1.200 do 10.000 rubalja.

Da biste dobili pouzdane rezultate PCR analize za hepatitis C, trebate kontaktirati samo renomirane laboratorije. U ovom slučaju, pitanje troškova istraživanja bježi u pozadinu.